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ROR2基因小干扰RNA表达载体构建及其功能


医錾 旱 理 论与 甄践 2 0 1 7 年第 3 0 卷第 1 3 期  V o 1 . 3 0 , No . 1 3 , J u l   2 0 1 7  J   Med   T h e or &P r ac 匿   1 8 7 3   ROR2基 因小 干 扰 RNA 表 达 载 体 构 建及 其 功 能  黄 建 军  石  莺  陈 忠益  曾国庆  丁振华  1 福建省厦 门市海沧 医院骨科 3 6 1 0 2 6 ;   2 厦 门医学院  摘要  目的 : 设 计和构建 RO R2 基 因特异性 的小干扰 RN A体 内表 达载体 , 筛选抑制 R O R2 表达 的有效小 干扰 RNA,   并初 步探讨 RO R 2的功能 。方法 : 化学合成法合成 重组质粒 R OR 2   s i R NA; 脂质 体法将其 转染人人 骨 肉瘤 S a o S - 2细  胞株 , RT - P C R和 We s t e r n - b l o t i n g法检验其对 R OR 2 基 因及蛋 白表达水 平的影 响。结果 : ( 1 ) 成 功构建 了针 对 R OR 2   的小干扰 RN A, 并 将其转染人人骨 肉瘤 S a o S - 2 细胞株 ; ( 2 ) RT - P C R结果显示 , 转染后 干扰组 RO R2   mR NA的表达水  平 明显低于阴性对照组 和空白组( P<O . 0 5 ) , 而空 白组和 阴性对照组 间的差 异无 统计 学意 义( P>O . 0 5 ) ; ( 3 ) We s t e r n -   b l o t i n g结果显示 , 转染后干扰组 R O R2 蛋 白表 达水平明显低于 阴性对 照组 和空白组 ( P<0 . 0 5 ) , 而空 白组 和阴性对 照  组 之 间差 异 无 统 计 学 意 义 ( P >O . 0 5 ) 。结 论 : 成功构 建 R OR 2   s i R NA, 该 质 粒 下 调 人 骨 肉瘤 S a o S - 2细 胞 中 R OR 2基  因和 蛋 白 的 表 达 水 平 。   关键 词 R NA干扰 R OR 2 小干扰 RNA 骨 肉瘤  中 图分 类 号 : R7 3 8 . 1   文献标识码 : A  d o i : 1 0 . 1 9 3 8 1 / j . i s s n . 1 0 0 1 — 7 5 8 5 . 2 0 1 7 . 1 3 . 0 0 1   C o n s t r u c t i o n   a n d   F u n c t i o n a l   An ly a s i s   o f   S h o r t   I n t e r f e r i n g   RNA  E x p r e s s i o n   Ve c t o r s   o f   Ta r g e t i n g   Ge n e   ROR2   H UA N G   J i a n j n n*, S i l l   Yi n g , C H E N   Z h o n g y i , e t   a 1 . *De p a r t me n t   o f   O r t h o p e d i c s , Xi a me n   Ha i c a n g   Ho s p i t a l , F  i a n   Pr o vi n c e  3 61 026   A B S T R A

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