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RNA干扰的重点


1. RNA 干扰的发现及其作用机制,微小 RNA(miRNA)的发现及其作用机 制。 双链 RNA 抑制其同源序列的表达 植物病毒单链 RNA 引起的基因沉默 dsRNA 产生的 siRNA 可以关闭基因 miRNA was first discovered in 1993 by Victor Ambros at Harvard (lin-4) The second miRNA Let-7 was discovered in 2000 by Frank Slack as a postdoc at Harvard(Ruvkun lab) 2. miRNA 一些重要的生物学功能 (特别是发育) , 及其在癌症发生中的作用。 1. miRNA in C. elegans development 控制发育时间 允许秀丽杆菌进展到终末期 不完全碱基配对 2. miRNAs in 脊椎动物 3. (控制植物表型特征) 4.(调控造血干细胞的分化) 5. (有些病毒编码 miRNAs) miRNA expression pattern changes during oncogenesis, and is unique for each cancer. 在癌症发生中,miRNA 表达谱的变化 One mechanism of miRNA controlling oncogene expression miRNA 调控癌基因表达的一种机制。 Some microRNAs are potential oncogenes 有些微小 RNA 可能是致癌基因。 3. siRNA 的产生方法。 1.Chemical synthesis: expensive 化学方法:贵 2.In vitro transcription of pre-miRNA with T7 promoter. 前体 mirna 有 t7 启动子的体外转录 3.In vitro transcription of long dsRNA by that are then cleaved by E. coli RNase III or RNase III-like DICER dicer 分裂 dsRNA 体外转录 及其在科研和治疗上的应用 1. Create induced phenotypes that can be observed over long time spans 制造诱导可以在很长时间内观察的表型 2. Create a stably engineered cells can be assayed either in vitro or in vivo, perhaps testing the angiogenic (血管生成) or metastatic (转移) potentials of tumor cells in xenograft models (异种移植模型)。 制造稳定的细胞可以在体内外分析,也许检测血管生成肿瘤抑制转移可 能性 3. create hypomorphic alleles (亚等位基因) rapidly in transgenic mice.

快速制造转基因小鼠的亚等位基因 4. Combine shRNAs with existing high-efficiency gene delivery vehicles to create bona fide RNAi-based therapeutics. For example, ultimately, to silence a disease-causing mutant allele specifically. Shrna 与已存高效率基因转移装置协同治疗 4. lncRNA 作用机制多样性。 大于 200 个核苷酸 不同于小分子 rna,大分子可以折叠成二级或更高级复合体 在不同生物进程中起重要调控作用 Basic modules of lncRNA action RNA-Protein RNA-DNA RNA-RNA The function of Long non coding RNAs(lncRNA 1.信号传导,2.诱捕,3.支架,4.指导 Epigenetic and transciptional 表型和转录 Allosteric change towards activation 应对活化的变构 Titrating transcription factors 滴定转录因子 Recruiting chromatin-modifying enzymes 招募染色质修饰酶 Bring together multiple proteins 集中不同的蛋白 Post-transcriptional 转录后 Antisense lncRNAs form duplex with the sense pre-mRNA 无意义 incrna 与有意义前体 mrna 协作 Bind the boundary site prevent the alternative splicing.结合边境点阻止剪切 microRNA “pools” mirna 池 microRNA “sponge mimra 海绵 Compete with miRNAs for binding the target mRNAs 与 mirna 竞争结合靶标 mrna half-STAU1-binding site RNAs 半 stau1 结合 rna (1/2-sbsRNAs) Positively or negatively modulate the translation ef?ciency 调控转录效率


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