当前位置:首页 >> 生物学 >>

植物RNA干扰的研究进展


2008年6月 2008,30(2):252—259 Chinese

中国油料作物学报
joumal
of oil crop sciences

植物RNA干扰的研究进展
马建,刘艺苓,王丕武+
(吉林农业大学生物技术中心,吉林,长春130118)

摘要:RNA干扰(RNA interference,RNAi)是利用双链RNA(dsRNA)特异性地降解相应序列的mRNA,从而特 异性地阻断相应基因的表达。在过去10年中,RNA干扰及相关沉默反应的机制研究取得了重大进展,RNAi也发 展成为一种强有力的实验工具,用来控制目的基因的表达以获取预期的生物表型。详细综述了近年来RNA干扰 机制方面的研究进展及RNA干扰在植物中的应用进展。 关键词:植物;转录后基因沉默;RNA干扰 中图分类号:Q786 文献标识码:A 文章编号:7861007—9084(2008)02—0252—08

The progress of RNAi in plant MA Jian,LIU Yi—ling,WANG Pi—Wu。

(The

Center

of Biotechnology,Jilin

Agricuhural University,Changchun 1 301 1 8,China)

Abstract:Introduction of double—stranded this process is called RNA

RNA(dsRNA)into

cells

can

induce specific mRNA degradation,

interference(RNAi).During

the past 10 years,tremendous progress has been made in


revealing the underlying mechanism of RNAi and related silencing responses.RNAi has become tool in regulating the expression of target genes for expected
or

powerful research

desirable phenotypes.In this article,the mechanism

of RNAi has been described and summarized,and the application of RANi in been reviewed.

plant

functional genomics has also

Key words:Plant;PTGS;RNAi

RNA干扰现象普遍存在于植物和动物中,是一 种古老的且进化上高度保守的基因调节机制,这一

事实上,早在1991年Cameron和Jennings等观 察到动物培养细胞同源转基因可使同源内源基因沉 默时,就提出了dsRNA可能参与基于同源性基因沉 默的设想旧】。1995年,Kemphues等在试图通过注 射反义RNA分子下调线虫基因表达时,发现注入反 义RNA和正义RNA几乎都能得到同样水平的基因 功能抑制效果,这与仅反义RNA能与内源性mR_NA 配对抑制其翻译的预想结果不一致口1,但当时未作 出合理解释。1998年,Waterhouse等研究表明,同 时携带与病毒基因组同源的正义和反义基因的转基 因植物比单独携带正义或反义基因的转基因植物具 有更强的病毒抗性,因此设想dsRNA参与触发了一 种RNA水平上的基因沉默作用H1。真正的突破来 自于1998年Fire和Mello的研究,他们证实用于制

机制对于验证未知基因功能、调控基因表达、保护生 物体免受病毒侵害具有重要意义。这一现象一经发
现立刻引起人们的高度重视,并迅速发展,已成为一 种强大的“基因沉默”技术,广泛应用于各种生物的

基因功能鉴定和功能基因表达调控领域。


RNA干扰的研究简史
在RNA干扰被发现以前,人们用“共抑制(co—

suppresion)”机制来解释生物中的转基因沉默现象,

共抑制是指所转人的外源基因和同源内源基因表达
同时减弱的现象。在共抑制被发现后的一年中共提

出过三种假说解释这一现象,但都不能令人满
意…。

备单链RNA(single—stranded

RNA

ssRNA)的常规

收稿日期:2008-01-09 基金项目:国家转基因研究与产业化开发专项基金(ZY03一B一17一01) 作者简介:马建(1979一),男,博士,主要研究方向:作物分子育种。E—mail:winteTOl06@163.corn ?通讯作者:王丕武,男,教授,博士生导师,研究方向:作物遗传育种及作物生物技术,Tel:0431—84532908;E—mail:peiwuw@yahoo.coin.cn

万   方数据

马建等:t/t物RNA干扰的研究进展
实验会产生少量双链RNA(double—stranded
RNA

253

等研究证明反义单链siRNA也可以诱导RNA干扰, 且反义单链siRNA和双链siRNA具有相同的作用
途径[1 0|,而经过修饰的反义单链siRNA诱导RNA 干扰的效果会明显增强¨1’12J。最近的研究还表明, 反义siRNA中心区的变化会降低RNA干扰效果,而

dsRNA),而在去除dsRNA后,反义ssRNA丧失了大 部分干扰活性,而正义ssRNA则完全失去活性,所 以dsRNA才是导致基因功能受到抑制的真正有效 诱导物,这一现象被命名为“RNA干扰(RNA
inter-

ference)”简写为“RNAi”Is]。因此,RNA干扰被定
义为,一些小的双链RNA(double—stranded dsRNA) 高效、特异地阻断体内特定基因表达,促使mRNA 降解,使细胞表现出特定基因缺陷表型的过程。随 着研究的不断深入,人们发现植物中由dsRNA介导 的基因沉默至少有3种:转录后基因沉默(post
scriptional gene
tran—

反义siRNA链5’端碱基的随机变化一如G:U—则
可以加强RNA干扰效果¨“。
2.1.2

TGS的作用机制

转录水平基因沉默(trail—

scriptional gene

silencing,TGS)发生在基因组水平

上,这一过程在植物中称为RNA指导的DNA甲基

化(RNA—directed DNAmethylation,RdDM),RdDM
过程中也有dsRNA参与∞o。在RdDM过程中,dsR— NA被切割成大于20nt的短RNA,RdDM引起与引 发RNA序列同源的靶DNA区域内所有胞嘧啶碱基 甲基化。在TGS中,根据特定启动子胞嘧啶甲基化 敏感度和在启动子区形成抑制性染色质构象的效率 不同,由启动子RNA引发的沉默可产生一种高度稳 定的转录抑制状态11 5|。dsRNA介导TGS的最基本 要求是包含启动子序列的dsRNA,目前为止唯一成 功的范例是将转录启动子反向重复序列作为转基因 插入宿主基因组中¨…。
2.1.3

silencing,PTGS);转录水平的基因沉
gene

默(transcriptional
rected

silencing,TGS)一这一过程

在植物中称为RNA指导的DNA甲基化(RNA—di— DNAmethylation,RdDM)L6I;miRNA引发的

基因沉默,而这3者之间又存在着一定的联系,其中 PTGS途径是目前为止人们认识最深入,也是应用最 广泛的沉默途径,其它两种沉默途径的研究也取得
了进展。 2

植物中由dsRNA介导的基因沉默 作用机制及特点
植物中dsRNA介导的基因沉默作用机制 这里所讨论的不仅仅是植物中PTGS的作用机

miRNA调节机制

最近的研究表明IIli—

2.1

cmRNA在RNA沉默中也发挥着重要作用¨“,miR? NA是一类含量丰富的无编码作用的小RNA,结构

制,而是植物中由dsRNA介导的几种基因沉默的作 用机制。目前发现的植物中由RNA介导的基因沉 默途径,都与Dicer酶将dsRNA剪切成21—26 RNA分子有关。
2.1.1
nt

上成熟的miRNA长约22nt,无ORF区,5 7末端为单
磷酸基,3 7末端为羟基,它是由长约70 nt的含茎环 结构的稳定前体经Dicer和其它因子加工而成的。

miRNA的序列在茎环结构的茎干部分,这些茎环结
在PTGS中,导人生物
interfer-

PTGS的作用机制

构是含有突起或内环的不完全发夹结构。miRNA

体内的或内源性转录生成的dsRNA被Dicer酶切割 成21~25nt的干扰小RNA即siRNA(short
ing

的作用机制目前尚不完全清楚,但一系列研究表明,
miRNA分子通过与特异mRNA的碱基配对负调节 基因表达,导致RNA被剪切或蛋白质翻译停滞¨8|。
2.1.4

RNAs),siRNA是一种3’端带有2个突出碱基

(多为尿嘧啶也可以是胸腺嘧啶)的短双链RNA,每 条链含有5’端磷酸基团和3’端羟基基团,这一结构 是siRNA进入下一步反应的必要结构特征¨1。 siRNA进一步与Argonaute家族蛋白及其他多种蛋 白成分结合形成无活性的RNA诱导的沉默复合体 (RNA—induced
silencing

RNA介导的基因沉默与DNA甲基化



际上TGS和PTGS均与序列特异的DNA甲基化相 关【l 9.201,不同之处在于PTGS中甲基化发生在蛋白 质编码区域【211,而在TGS中甲基化则发生在启动子 上mJ。在PTGS中如果蛋白质编码区所有胞嘧啶

complex,RISC),之后在

都发生甲基化,转录延伸就会终止。高密度甲基化
DNA模板导致转录提前成熟和终止,进而产生异常 RNA,这些异常的RNA可作为RNA依赖的RNA聚 合酶(RNA—dependent
RNA polymerase

RNA解旋酶的作用下,RISC中双链螺旋siRNA解 链,正义siRNA被去除,无活性的RISC生成有活性 的RISC,最后由RISC介导siRNA反义链与靶mR— NA分子互补结合并引起同源性靶mRNA分子被切

RaRe)的底

物,而这种酶对植物的PTGS是必需的。因此,通过 产生RdRP活性合成dsRNA所需的模板,蛋白质编 码区持续的RdDM可激活PTGS通路旧1。而最近 研究证实植物中siRNA也能引起转录水平的沉默,

割¨,1。值得注意的是,如前所述,在Fire和MeUo
的研究中,去除dsRNA后反义单链siRNA只是丧失

了大部分活性,并没有丧失所有活性。Torgeir

Holen

万   方数据

254

中国油料作物学报2008,30(2)
高度碱性蛋白质,含有PAZ和PIWI两个结构 域mj51。PAZ区域由130个氨基酸组成,位于蛋白

si砌iA指导的DNA甲基化与组蛋白修饰有关ⅢJ。 现在人们正在研究miRNA作用途径与RNAi

作用途径之间的关系以确定二者之间是否存在相同
的作用途径或共同分享一些作用元件u
7。。

质中心,PIWI区由300个氨基酸组成具有高度的保
守性。虽然Argonaute家族蛋白都具有一致的结构 模式,但其不同成员的结构及生物学功能不同。现 已分离了多个Argonaute蛋白,如:AG01、AG02、 AG03、aubcrgiBe等【36。。研究表明拟南芥中AG01

2.1.5干扰信号的扩增及传递在对RNA干扰的

研究中发现,一个细胞中只要有几个双链RNA就能
将靶基因沉默,Sijen等证明在RNA干扰初期RdRP 能以双链RNA为引物,并以靶mRNA为模板合成 更多的双链RNA,使双链RNA得到扩增放大。实 验表明,新形成的siRNA有一部分来自于一种RNA

具有核酸内切酶活性,最小RISC中只含有AG01和 siRNA,说明AG01本身具有剪切活性,可能不需要 其它相关蛋白口7。。
2.2植物中RNA干扰的特点 植物中RNA干扰具有如下特点:(1)在确定基 因功能时具有靶向性,在一个沉默载体中插入部分 基因序列就能确定某一基因的功能;(2)能用来选 择性地沉默某一基因家族中的单个基因或同时沉默 一个基因家族中的多个基因;(3)PTGS能确定在敲 除后发生发育早期死亡的基因功能;(4)PTGS具有 系统性,可以通过植物的维管系统传递到植物的其 它部分;(5)PTGS易于用于大规模、高通量的系统 研究。人们通过构建RNAi文库已成功的对线虫胚 胎发育进行了研究∞81,此项工作在植物体系的研究 中也正不断取得进展。

聚合酶链式反应,该反应以siRNA中一条链为引
物,以靶mRNA为模板,在RdRP的作用下扩增靶 mRNA产生新的siRNA,而这些新的siRNA又能继 续作用于靶mRNA,使其降解【251。此外,细胞中的 非正常mRNA也可以在RdRP的作用下合成双链 RNA,这些双链RNA在Dicer酶作用下产生siRNA 诱发RNA沉默旧6。。 植物中RNA沉默能够通过植物大分子运输系 统进行系统扩散。植物中大分子运输系统有通过胞 间连丝进行的细胞问运输和通过韧皮部转运系统进 行的长距离运输心7’勰】。系统性沉默的主要功能被 认为能在整个植物体转移病毒抗性,阻断病毒迸一 步感染。植物中已经证实,在接穗和根株之间可以 发生系统性沉默【29|。 2.1.6与RNA干扰有关的酶Dicer酶是RNase

3植物中RNA干扰的诱导方法及比较
植物中RNA干扰可以通过如:农杆菌介导法、
粒子轰击法、稳定转化法、病毒介导法(virus—in—
duced gene silencing

Ⅲ的同源分子,一种ATP依赖性蛋白。Dicer酶包
括五个标准的结构域:N一端解旋酶区域、PAZ区

域、两个Ⅲ型核糖核酸酶区域及dsRNA结合区域,
其中核糖核酸酶区域及dsRNA结合区域是主要功 能结构域[30I。现在已发现多个Dicer酶类蛋白,如: DCR一1、DCR一2、DCL一2等。Dicer酶一方面参与 调节性小RNA的成熟加工,另一方面以一种序列非 特异性方式切割几乎所有的dsRNA以提供精确的 短双链RNAH“。 RNA依赖的RNA聚合酶(Ram')在转录后基

V[GS)等方法实现。农杆菌介

导法是一种快速、可靠、低成本的方法,首先用于将 dsRNA引入植物使基因沉默∞9I。在使用农杆菌介 导法时,人们多用根瘤农杆菌,现在Erik Limpens等 已经证实在研究根的实验中,发根农杆菌是一种更 快速、有效的选择【柏J。粒子轰击法相对快速,但转 化效率较低。稳定转化法如:聚乙二醇(PEG)介导 法及电击穿孑L法等已在多种不同种属植物中成功应 用,但其周期过长不适于大规模鉴定基因功能。病 毒介导的基因沉默法是利用病毒把目的基因序列导 人植物宿主,其产生的dsRNA随着病毒在植物体内 的复制传播介导基因沉默。现在已研究开发了多种 用于VIGS的载体如:基于TMV的载体、基于PVX 的载体、基于TRV的载体等【41I。

因沉默(r,rGS)中起着重要作用。现已从植物中分
离纯化了RdRP,通过SDS—PAGE及天然条件下蔗 糖密度梯度离心测定其分子量分别为128kD和 115kD,二者相差约10%,揭示RdRP可能是一种球 状蛋白[32,33】。实验显示RdRP在无引物条件下也可

以催化转录,其主要作用是放大RNA沉默信号,使
双链RNA得到扩增。目前已发现多种RdRP蛋白, 如:SGS2/SDEl、RDR2、EGO一1、QDE一1等ⅢJ。

4植物RNA干扰目的片段的选择与 表达载体构建
植物中无论采用什么样的导入方法,构建RNA

Argonaute家族蛋白是分子量大约为100kD的

万   方数据

马建等:植物RNA干扰的研究进展
干扰表达载体都是比较常用的。无论是在基因功能 分析还是在品质改良方面,用于构建表达载体的目 的基因片段都应是外显子片段,所以从mRNA人手 选取目的片段不失为一种好的方法。如欲沉默一个 基因家族中的多个基因,则应尽量选取同源性高的

255

序已经完成,人们获得了大量候选基因,RNA干扰

技术为分析这些基因功能提供了一种快速、高效的 途径,这方面的工作已取得大量进展旧。引,Daisuke
Miki等已经证明RNA干扰机制在水稻中具有很高 的保守性,而dsRNA介导的RNA干扰是分析水稻

部分作为目的片段。一般认为,用于RNA干扰的基
因片段长度在200bp一1000 bp之间都能发挥抑制 作用,究竟多长的片段能引发最佳的RNA干扰效果

及其它植物高度保守的多基因家族的有力工具H引。
在豆科植物中,Senthil等应用RNA干扰技术分析了 异黄酮合成酶基因在大豆子叶和根部的作用及其对 异黄酮积累的影响∞¨。李小平等从人工诱导的大 豆叶片中克隆得到了一个新的LRP型类受体蛋白

尚无定论,但片段过长被认为可能引起非特异性沉
默。RNA干扰的有效传递,稳定性的提高,非目标 效应的减小以及目标RNA敏感位点的确定等是其 必须考虑的问题,现在已有多家专业网站提供用于

激酶基因rlpk2,并应用RNA干扰技术验证了其与
大豆叶片衰老有关"8|。豆科植物根瘤素合成基因 ENOD40虽然很早就为人们所知道,但它在根瘤形 成过程中的基本作用一直不为人们所了解,Hirotaka Kumagai等应用RNA干扰技术证实,ENOIM0基因 对根瘤的产生和后续生长是必需的,但和根瘤菌与 植物之间早期的相互作用无关H91。 需要指出的是,应用RNA干扰分析生物的基因 型和表型之间的关系时,一个重要的前提是RNA干

RNA干扰目的片段选择方面的软件,如:蔓业;丝皇= 翌堑:堕堕:鱼芝,蔓业;丝翌生:生堕:韭:垫业;丛璺鲤竖:
£!塾!:旦!警!)b!!巳;』』!!竺型:望!璺i:Q垡!b堕巳;!!呈!坚!!曼!二!: mpi—cbg.de/Deqor/deqor.html等【42州J。研究表明 植物中RNA干扰表达载体的最佳结构为能转录生 成含有功能性内含子的发夹RNA(intron—contain-
iny

hairpin RNA

ihpRNA)的载体。转录体拼接产生

的功能性间隔(spear)内含子在特异基因沉默时比 无功能内含子更有效。在用带有ihpRNA结构表达 dsRNA的植物中90%显示出了沉默效应,而用含有 发夹结构的RNA(hairpin
RNA

扰片段是有效的,且siRNA能有效传递并通过细胞
培养显著的表现出特定的转录后基因表达受抑制。

但实际中,由于基因的不同沉默水平及基因型和表
型之间的复杂联系,常常会导致观察到无效的或者 异源的siRNA,所以能对有效的siRNA进行追踪变

hpRNA)、正义和反

义结构则分别有50%、13%和12%显示沉默效应。 目前运用Invitrogen公司的Gateway克隆技术以 pHANNIBAL载体为基础开发出了通过ihpRNA介 导PTGS的被称为pHELLSGATE的高通量载体口¨。
Daisuke

的十分重要。为了解决这一问题Alice A.Chen等
开发了一种将未变性的siRNA与半导体量子点 (seminconductor
quantum dots

QDs)结合,来衡量

Miki和Ko Shimmrnoto也根据Gateway技术

siRNA投送能力的方法㈣o。 5.2植物抗病性方面的应用 在植物抗病性方面,应用RNA干扰原理,通过

开发了一种专门针对水稻基因组功能分析的RNA

干扰载体一pANDA M¨。
对于控制细胞基本功能和发育的基因来说,基 因沉默可能阻碍正常的细胞生长或导致胚早期死

农杆菌介导将外源病毒的基因或基因片段导入目标 植物基因组,能使入侵的病毒或同属中相近病毒的
RNA降解,病毒便无法在植物体内扩增,转基因植 物因此获得抗性。利用RNA干扰的原理,人们将水

亡,为解决这一问题,Guo等构建了一种通过化学调 控诱导ihpRNA的载体一Gre/loxP(CLX)系统。在
拟南芥和烟草的实验中,这一系统可以被严格控制,

并能高效诱导外源及内源基因在不同发育阶段的沉
默,且无副作用【耜J。 5

稻黄斑病毒(RYMV)复制所必需的某种酶基因导入 水稻,通过诱导RNA干扰,已培育出具有RYMV抗 性的水稻,并已稳定遗传三代哺¨。Abbott等以大麦 黄矮病毒(BYDV—PAV)的多聚酶基因反向重复序
列载体转化大麦,获得PAV免疫植株,ELISA检测 和田间接种均未检测到病毒旧】。Tenllado等在细菌

RNA干扰在植物中的应用
RNA干扰因其自身的优点,已越来越成为分子

生物学研究中的有力工具,广泛应用于从基因功能 鉴定到物种改良的各个方面。 5.1植物基因功能分析

中研发了一种可以大量产生dsRNA的活体表达系 统,在病毒接种前8天用一种名为“French press”的
溶菌液喷洒粗提的细菌到植物表面就可以起到防止 病毒的作用,这一方法使使用RNA干扰防治植物病

RNA干扰因其具有特异的靶向性成为分析基 因功能的有力工具。现在水稻和拟南芥的基因组测

毒病更为简便实用旧】。

万   方数据

256

中国油料作物学报2008,30(2)
RNAi植株的生育能力下降,部分表现出雄性不 育‘711。

5.3植物抗逆性方面的应用

RNA干扰技术应用于植物抗逆性方面的研究
尚处于起始阶段,但对模式植物拟南芥的研究中发 现,经不同胁迫处理的拟南芥中含有分别归属于15 种基因家族的26类新miRNAⅢJ。Fatrma等的进一 步研究表明,在4℃冷休克胁迫下诱导产生的BMY8

远源杂交或自交不亲和性是育种中常遇到的问
题,McClure等的研究发现HT基因和花粉的自交不

亲和性有关H2l。在S.13hacoense植物中HT基因分
为ScHT—A和ScHT—B两种,013rien通过构建
ScHT—B

RNAi株系能够特异的适应冷休克胁迫,具有BMY8
表达表型的BMY8 RNAi株系在4。C冷胁迫下处理 6h后,与野生型相比体内麦芽糖含量明显降低。实

RNA干扰系统证明只有SeHT—B基因和

自交不亲和性有关,并发现要维持自交不亲和现象 至少要有30%的ScHT—B基因¨“。

验表明在冻胁迫作用下增加植物体内麦芽糖含量有
助于保护电子传递链上的蛋白质ⅢJ。
5.4

6展望
RNA干扰现象从发现至今不过近十年的历史,
但其在农业领域的发展相当迅速,已应用于多种粮 食作物、油料作物、经济作物的基因功能鉴定、品质 改良和抗性研究等方面。虽然目前tlNA干扰的一

改良植物营养价值方面的应用 在改良植物品质方面,RNAi技术被认为具有极

大的应用价值旧J。 在植物中,同一基因的蛋白质产物,可能广泛存 在于植株的不同部位,因此,某一对改良种质有益的 基因突变对其它器官往往是有害的,应用RNAi技 术结合不同器官的特异启动子可以有针对性地改良 植株特定部位的品质,而不涉及其它植物器官,如: 植物种子中赖氨酸含量的增加是有益的,但在植物 生长组织中赖氨酸含量的增加会导致植物生长和开 花的异常,使种子产量下降,通过使用种子特异启动 子的RNAi技术可使几种作物种子中氨基酸含量增 加的同时,又不会使植物的生长受到影响。比利时 的Crop DesiRn公司正是应用RNAi技术鉴定具有 农艺性状的基因并进行可增加谷物产量的基因改造

些机制还不为人们所完全了解,但随着研究的不断
深入,RNA干扰的面纱必将被彻底揭去,其在农业

各领域将发挥越来越大的作用。
参考文献:
[1]Greg
Harmon.RNAi:A guide
to

gene

silencing[M].

New York:Cold Spring Harbor Laboratory Pres8,2003.5 —21.

[2]Cameron
sion with

F H,Jennings P A.Inhibition of gene expres-


short

15elrlSe

fragment[J].Nucleic

Acids Re8,

1991,19:469-474.

工作。李加瑞等应用RNA干扰技术以WAXY基因
为靶基因极大地降低-rlJ,麦中直链淀粉的含量№引。 Kusabs及同事更是采用RNAi技术生产出能降低麦 谷蛋白表达水平的稻米种类LGC一1(10w 立[68】 1El
glutein

[3]Cuo

S,Kemphues K

J.par一1,a

gene

required

for睁


tablishing polarity in C elegana embryos.encodes tire Ser/Thrkinase that is asymmertrieallr Cell,1995,81:611—620.

puta-

distributed[J].

[4]Waterhouse

P M,Graham M

w,Wang M pl蛐ts
can

B.Virus静
by RNA[J].

content),给不能消化麦谷蛋白的肾脏病人带来福


sistance and gene silencing in simultaneous expression of

be induced

8ense

and an6sertse

5.5雄性不育系及育性恢复中的应用

Proc Nail Acad Sei,1998,95:13 959—13 964.

雄性不育系及其恢复系在育种上具有重大意 义。现在人们开始通过RNA干扰技术来控制植物
花期,研究植物雄性不育系及育性恢复,这样做的优 势在于不仅可以培育出可控制的稳定遗传的不育植 株,而且可以减少基因污染、控制花期、缩短育种周 期。Meilan等应用RNA干扰技术已经在白杨中发 现了和拟南芥同源的花发育基因,并获得了可稳定 遗传的雄性不育白杨突变体旧’70】。Satoru等从水稻

[5]Fire

A,Xu S,lVIello C C,et a1.Potent and specific ge- double—-stranded RNA in Cae??

netie interference by norhabd/t/s

elegans[J].Nature,1998,391:806—811.
M.RNA—directed DNA

[6]Wassenegger

me町lation[J].

Plant Mol Biol,2000,43.203—220.

[7]Ⅳlartinez J,Patkaniowska
alltJselrlse siRNAs

A,Vrlaub H.Single—stranded target RNA deavage in RNAi

gIlide

[J].Cell,2002,110(5).563—574. [8]l、/ykanen
A,Haley B,Zarnore P,D.ATP requirement in the RNA interfer-

中克隆得到RAD2/XPG核酸酶家族中的OsGEN—L
基因,并构建了OsGEN—L—RNAi转基因株系,结 果显示OsGEN—L—RNAi株系中花粉粒早期发育

and small interfering RNA
ence

structure

pathway[J],Cell,2001,107(3):309-321.
G,Zii.1flllOl'e P D.RNAi:nature abhors Opi.C,enet


【9]Hutvagner

doub-

有缺陷无法形成成熟的花粉,大多数OsGEN—L—

le—stranded[J].Curt

Dev,2002,12(2):

万   方数据

马建等:植物RNA干扰的研究进展
225—232.

257

缸培一inactivation[J].G
—1 483.

R Aend Sci,1993,316:1 471

[10]

Torgeir Holen,Mohammed Amarzguiou/,Eahrat Babaie,
et

a1.Similar behaviour of single—strand and double—
act

[23]

Chicas A,Macion G.Characteristics of post—transcrip- tional gene 996.

strand siRNAs suggests they

tllmugh a

conlnlon

RNAi

silencing[J].EMBO Rep

z:2001.992—

pathway[J]。Nucleic
2 401—2 407.

Adds

Research,2003,31(9): [24]
Spesock,et a1.Po- boranophosphate

Xiaoyu

Zhang,Jtmshi Yazald,Ambika S,et a1.Ge—
a?-

[11]

Allison H S

Hall,Jing W锄,April

nome—-wide high—-resolution mapping and functional nalysis of DNA methylation in

tency

silencing by

single—s仃anded Acids

Arahidopsis[J].Cell,

siRNA[J].Nucleic
2 773—2 781.

Research,2006,34(9): [25]
n—

2006,126(6):1 Sijen

025—1

028.

T,Fleenor J,Simmer F.On the role dsRNA—triggered gene

of

RNA锄一

[12]

Allison H S sing

Hall,Jing W粕,et a1.RNA interference

plification in

silencing[J].

boranophosphate 8iRNAs:strtlctttre—activity rela-

Cell,2001,107:465—476.

fionships[J].Nucleic Acids Research,2004,32(20):
5 991—6 000.

[26]

赵明敏,赵建,郭永清,等.RNA干扰及其在植物 研究中的应用[J].农业生物技术科学,2006,4:36—

[13]

Torgeir Holen,Svein Efik Moe,Jan

Gunnar,et a1.’I’ol?

39.

crated wobble mutations in siRNAs decrease specificity, but
can

[”]

Minsung

Kim,Wynnelena Canio,Sharon Kessler,et changes due
to

enhance

activity in

vivo[J].Nucleic Acids

Re—

a1.Developmental ment of


long—distance move?

search,2005,33(15):4 [14]
Bender

704—4 710.

homeobox fusion transcript in

tomto[J].Sel?

J.A vicious cycle:RNA silencing and DNA me

ence,2001,293(13):287—289. [28]
Voinnet O,Vain P,Angeil S,et a1.Systemic spread of sequence—specific transgene RNA degradation in plants is initiated by localized introduction of ectopic promoter- less

—thylation in

plants[J].Cell,2001,106:129—137.
W,Van der Winden J,et a1.

[15]

Merle M F,Aufsatz

Transcriptional gene silencing and promoter methylation triggered by double 19:5 194—5 201.

stranded RNA[J].EMBO J,2000,

DNA[J].Cell,1998,95:117—187.
W J,Yoo B C,kragler F.RNA as
information macromoleeule in the


[29]
root

Lucas
tance

long—dis?

[16]

Barrel B,Barrel D P.MicroRNAs:at the

of

plant
of of

plants[J].Nat

development[J].Plant [17]

Physiol,2003,132:709-717. K D,et a1.Cleavage


Rev Mol Cell Boil,200l,11:849—857.

1Aave C,Xie Z,Kasschau

[303

Bemtein E,Caudy A A,Hamond S M,et a1.Role for


scarecrow—like mRNA targets directed by
Arabidopsis 2 056.

class

bidentate ribonuclease in the initiation step of RNA in-

miRNA[J].Science,2002,297:2

053—

terference[J].Nature,2001,409:363—366. [31]
Sclliebel

W,Haas B,Marinkovic S,et a1.RNA—di-

[18]

Wianny F,Zemicka—Goetz M.Specific interference
witll gene function by double—stranded RNA in early mouse development 75.

mctcd RNA tion

polymerase

from tomato

leaves.I.Purifies-

and physical properties[J].J Boil Chem,1993,

Nat【J].Cell

Bid,2000,2:70—

268:11 851—11 857.

[32]
G.Macino reqtlires


Michael

W,Gabi K.Nomenclature and functions of RNA

[19]

Cogonz
crassa

G.Cene

silencing in
to

Neurospora

—directed RNA

polymerases[J].Trends

in Plant

Sci?

protein homologous

lENA—depend-

ence,2006,3:142—152.

ent

RNA

polymerase[J].Nature,1999,399:166—

[33]

Ceruttl cing main

L,Mian N,Bateman

A.Domains in gene sflen-

169.

and and

cell differentiation proteins:11le novel DAZ do- redefinition of Piwi

[20]

Zngelbrecht I,Van Houdt H,Van Montagu M,et al Pesttranscripfional silencing of reporter transgenes in
bacco correlates with DNA
to-

domain.[J].Trends

Bio-

chem Sci,2000,25:481—482.

methylation[J].Proc

Nail

[34]

Carmell

M A,Xuan Z,Zhang



Q.The

Argonaute

Acad Sci,1994,91:10 502—10 506.

family:Tentacles that reach into RNAi,developmental control,stem cell

[21]

Vaucheret H.Promoter—dependent trails—inactivation in transgenie tobacco lencing

maintenance,and tumorigenesis[J].

plants:kinetic aspects of gene Si—

Cene
[35] and

Dev,2002,16:2 733—2 742.

and gene reactivation[J].C R Acad Sci,1992,

Faeard M,Boutet S,Morel RDE一1
are

J B,et a1.AG01,QDE一2
proteins required for post—

317:310—323.

related

[22]

Vaucheret H.Indentification of



general silencer of 19S

transcriptional gene

silencing in

plants,quelling in fun?
Nail Acad

and 35S promotem intransgenic tobacco plants:90bp of
homology in the promoter

gi,and

RNA interference in

animas[J].Proc

sequence a陀sufficient for

Sic,2000,97(21):11

650—1l 654.

万   方数据

258

中国油料作物学报2008,30(2)
S,Fire A.Distinct roles for RDE一1 and RDE一 interference in Caenorhabditis elegana in

[36]Parrish


delaying

leaf

senescence in rlce[J].Plant Physiolo-

during RNAs

gy,2006,4:1 376—1 388.

[J].RNA,2001,7:1 [37]Wesley

397—1 402.

[503

Papon N,Vansin A,Gantet P,et

a1.Ristidine—contai—

S V,Helliwell C A,Smith N A,et a1.Construct

ning phosphotransfer domain extinction by RNA interfer-
ence

design for efficient effective silencing in

and

hi曲一throughput

gene

turns
roseus

off



cytokinin

signaling

circuitry in Cathatan— FEBS Lett,2004。

plants[J].Plant,2001,27:581-590.

mw

suspension cells[J].J

OS]Fraser

A G,Kamath R S,Zippeden P,et a1.Functional-

558:85—88.

genamie analysis of C elegans chromosome I by systemic RNA

[51]Koga

A,Ishibashi T,Kimura S,et a1.Characterization

interference[J].Nature,2000,408:325—330.
H,Kunz c,Meins F

of T—DNA

insertion mutants and RNAi silenced plants

[39]

Sehob

J.Silencing of transgenes in—

of Arabidopsis thaliana UV—damaged DNA binding pro-
tein

troduced into leaves by agroinfihration:A simple,rapid? method for investigating sequence reqmrements for gene

2(AtUV—DDB2)[J].Plant

Molecular

Biology,

2006,4:227—240.

silencing[J].Mol [40]
Erik

Gen Genet,1997,256:581-585.

[52]Zhang Liangran,Tao Ji咖,Wang
rice is

Shunxln,et
yeast

a1.The
Mol Biol,

Limpeus,Javier nanl08,Carnlien Franken,et a1.
in Agrobacterium rhizogenes?-trans?? and Medjca90

OsRed2l一4,an

orthologue of

Rec8 protein,

RNA interference formed
roots

required for efficient

meiosis[J].Plant

of Arabidopsis of Experimental

truneatula

2006,4:533—554.

[J].Journal
9912.

Botany,2004,55:983—

[53]Jensen



E,Hal&up A,Zhang S,et a1.The PSI一0 plant photosyststem I is involved in balancing
two

subunit of C

[41]Peele C,Jordan
meristematic

V,Muangsan,et al,Silencing of
using gemini virus—derived



the excitation prossure between

photosystems[J].J

gene

vectors

Biol Chcm,2004,279:2 4212—2 4217.

[J].Plant,2001,27:357—366. [42]
Zeynep

[54]Ketelaar T,Allwood

E G,Anothony R,et a1.The actin

Arglman,Thomas Horn,Michael Boutros.E—
to

—-interacting protein AIPl is essential for actin organiza-? tion and

RNAi:a web application

design

optimized RNAi

con-

plant development[J].J Curt Biol,2004,14

stxucts[J].Nucleic
W588.

Acids

Research,2005,W582一

(2):145—149. [55]Stevens
R,Grelon M,Vezon D,ct a1.ACDC45 homolog

[43]Thomas

Horn,Zcynep

Arziman,Juerg

Berger,et

a1.

in Arabidopsis is essential for meiosis.幽shown by RNA interference—induced gene

Genomc RNAi:a database for cell—based RNAi phenc_

silencing[J].J

Plant Cell,

types[J].Nucleic Acids Research,2006,32:492—
497.

2004,16(1):99—113. [56]Daisuke
Miki,Rika Itoh,Ko Shimamoto.RNA silencing

[44]Olson

A,Sheth N,Lee

J S,et a1.RNAi Codex:a per-

of single

and multiple members in



gene family of

rice

tal/database for short—hairpin silencing

RNA(shRNA)gene—
Research,2006,

[J].Plant Physiology,2005,138:1 [57]

903—1 913.

eonstrncts[J].Nucleic Acids

Senthil Subramanlan,Madge Y Graham,et a1.RNA in? terference of

34:153—157.

Soybean

is oflavone synthase gene leads
to

to

[45]Kristin



Gunsalus,Wan—Chen

Yueh,et a1.RNAiDB

silencing in tissues distal

the

transformation site and

and PhenoBlast:web tools for genome—wide phenotypic mapping

euhancod susceptibility

to

Phytophthora

Sojae[J].Plant

projects[J].Nucleic Acids

Research,2004,

Physiology,2005,137(4):1 [ss]

345—1 353.

32:406—410.

李小平,马嫒嫒,李鹏丽,等,利用RNA干扰敲减 rlpk2基因的表达可以延缓大豆叶片衰老[J].科学 通报,2005,11(50):1
090—1 096. Kinoshita,Robert

[46]

Andreas Henschel,Frank Buehholz,Bianca Habermann.

DEQOR:a

web—based tool for the design

and

quality

oontrol of siRNAs[J].Nucleic Acids Research,2004,

[59]Hirotaka

Kumagai,Eri

W.et a1. significant

32(Web [47]Dalsuke
stable

Server

Issue):W113一W120.
vectors

RNAI knock—?down of for suppression ofnodule

ENOIM0s leads

to

Mild,Ko Shimamoto.Simple RNAi transient suppression

Formation inLotusjapordcus[J].
102—

and

of gene function in rice

Plant and Cell Physiology,2006,47(8):1
1 111.

[J].Plant [483

and Cell Physiology,2004,45:490—495. J F,Xie

Guo H S,Fei

Q,et

a1.A chemical—regulated

[60]

Alice A

Chen,Austin M Deffus,Salman R,et a1.
dots
to

inducible RNAi 383—392.

system in

plants[J].Plant,2003,34: n钾d nuclear—localized

Quantum
gene

monitor RNAi

delivery

and improve

silencing[J].Nucleic

Acids Research,2005,33

[49]

Zhaosheng Li,Meina Y.A

(22):e190.

CCCH—type zinc finger protein,OsDOS,is involved

[61]Pinto

Y M,Kok R

A,Bandcombe



C.Resistance to

万   方数据

马建等:植物RNA干扰的研究进展
flee yellow motile

259

virus(RYMV)in

flee varieties containing

RYMV吣ene8[J].Nature
P A.A single copy of

cultivated Afric锄tl

[醅]

Kusaba M,Miyahara K,Iida S,et tentl:a

a1.k啊ghtelin

con-

dominant

mutation that suppresses the glutelin

Biotechnology,1999,17:702—70r7.

multigene family via RNA

silencing

in

rice[J].Plant

【62]

Abbott


D,Wang



B,Waterhouse

Cell,2003,15:1 455—1 467.

virusderived transgene encoding halrpin
to

edna givos im-

[69]

Chloa—Fen

Chuang,Meyerowlte thaliana[J].Prec

E M.Specific and her-

munlty

barley yellow dwarf

vine[j].MolecularPlant

itable genetic Arabidopsis

interference by double stranded RNA in
Natl Acad Sci VSA,

Pathology,2000,1(6):347-356. [63]
Tenllado F,Martinez—GarciaB,Vargas M,et
extracts

a1.Crude
be used
to

2000,97:4 985—4 990.

of

bacterially懿pres∞d dsRNA

carl

[70]

Mcilan R,Branner A M,Skinner fion

J S,et a1.Modifiea-

protect plants ngaillst virus

infections[J].JBMC

Blote-

of flowering intransgenic trees[A].Morohoahi N,

chonl,2003,3(1):3. [64] Ramanjulu S。Jian—kang
Zhu.Novel and stress—regu—

komamine A.Moleeulatr Breeding of woody plant[c].

而e 【71]

Nethedand:Ekevier SciBv.200l。4l:247—256.

lated microRNAs and other small RNAs form Arabidop-

Satoru M,Daisuke M,Masahim A,ct a1.RNAi—media—

sis[J].The [65]

Plant Cell,2004,16:2 001—2 019.

ted

Silencing of

OsGEN—L(OsGEN—llke),a

neq#

Fatma K,Guy

Charles L.RNA interference of Arabidop-

member of the RAD21 XPG nuclease family,cause male sterility by defect of

8i8 beta—amylase 8 prevents maltose accumulation upon cold shock and increase sensitivity of PSH photochemical efficiency tofreezing

mlcrospore

development in

rice[J].
self—in-

Plant Cell physi01.2005.46:699—715.

stress[J].The

Plant

Journal,2005,

[72]

M Clure B A.Haring V,Ebert PR,et a1.Style compatibility prouducts

(44):730—734. [66]
Gnihang Tang,Gad Galill.Using RNAi
nutritional value:from mechanism Trends in
to to

of Nicotiana data arc ribonucle—

improve

plant [73]

ases[J].Nature,1989,342:955—957.
OBrien M,Kapfer

application[J].

C,Major C,et

a1.Molecular analysis

Biotechnology,2004,22(9):24—29.

of the stylar—expressed Solanum chacoense small aspar- agines—rich protein family rehted gamctophy self—incomputibility
to

[67]

李加瑞,赵伟,李全梓,等.Waxy基因的RNA沉默使 转基因小麦种子中直链淀粉含量下降[J].遗传学 报,2005,32(8):846—854.

the HT modifier

of

in

Nicotiana[J].

Plam,2002,32(6):985—991.

万   方数据

植物RNA干扰的研究进展
作者: 作者单位: 刊名: 英文刊名: 年,卷(期): 被引用次数: 马建, 刘艺苓, 王丕武, MA Jian, LIU Yi-ling, WANG Pi-Wu 吉林农业大学生物技术中心,吉林,长春130118 中国油料作物学报 CHINESE JOURNAL OF OIL CROP SCIENCES 2008,30(2) 7次

参考文献(73条) 1.Greg Harmon RNAi:A guide to gene silencing 2003 2.Cameron F H;Jennings P A Inhibition of gene expres-sion with a short sense fragment[外文期刊] 1991 3.Guo S;Kemphues K J par-1,a gene required for es-tablishing polarity in C.elegans embryos,encodes a puta-tive Ser/Thrkinase that is asymmertrieally distributed[外文期刊] 1995 4.Waterhouse P M;Graham M W;Wang M B Virus re-sistance and gene silencing in plants can be induced by simultaneous expression of sense and anfisense RNA[外文期刊] 1998(23) 5.Fire A;Xu S;Mello C C Potent and specific ge-netic interference by double-stranded RNA in Caenorhabditis degans[外文期刊] 1998 6.Wassenegger M RNA-directed DNA methylation[外文期刊] 2000(2/3) 7.Martinez J;Patkaniowska A;Vrlaub H Single-stranded antisense siRNAs guide target RNA cleavage in RNAi[外文期刊] 2002(05) 8.Nykanen A;Haley B;Zamore P,D ATP requirement and small interfering RNA structure in the RNA interfer-ence pathway[外文期刊] 2001(03) 9.Hutvagner G;Zamore P D RNAi:nature abhors a doub-le-stranded[外文期刊] 2002(02) 10.Torgeir Holen;Mohammed Amarzguioui;Eshrat Babaie Similar behaviour of single-strand and doublestrand siRNAs suggests they act through a common RNAi pathway[外文期刊] 2003(09) 11.Allison H S Hall;Jing Wan;April Spesock Po-tency silencing by single-stranded boranophosphate siRNA[外文期刊] 2006(09) 12.Allison H S Hall;Jing Wan RNA interference u-sing boranophosphate siRNAs:structure-activity relationships[外文期刊] 2004(20) 13.Torgeir Holen;Svein Erik Moe;Jan Gunnar Tol-erated wobble mutations in siRNAs decrease specificity,but can enhance activity in vivo[外文期刊] 2005(15) 14.Bender J A vicious cycle:RNA silencing and DNA me-thylation in plants[外文期刊] 2001 15.Merle M F;Aufsatz W;Van der Winden J Transcriptional gene silencing and promoter methylation triggered by double stranded RNA 2000 16.Barrel B;Barrel D P MicroRNAs:at the root of plant development 2003 17.Llave C;Xie Z;Kasschau K D Cleavage of scarecrow-like mRNA targets directed by a class of Arabidopsis miRNA[外文期刊] 2002 18.Wianny F;Zernicka-C;oetz M Specific interferenc with gene function by double-stranded RNA in early mouse development Nat 2000 19.Cogonz G;Macino G Cene silencing in Neurospora crassa requires a protein homologous to RNA-

depend-ent RNA polymerase[外文期刊] 1999 20.Zngelbrecht I;Van Houdt H;Van Montagu M Posttranscripfional silencing of reporter transgenes in to-bacco correlates with DNA methylation[外文期刊] 1994 21.Vaucheret H Promoter-dependent trans-inactivation in transgenic tobacco plants:kinetic aspects of gene Si-lencing and gene reactivation 1992 22.Vaucheret H Indentification of a general silencer of 19S and 35S promoters intransgenic tobacco plants:90bp of homology in the promoter sequence are sufficient for trans-inactivation 1993 23.Chicas A;Macion G Characteristics of post-transcrip-tional gene silencing[外文期刊] 2001(11) 24.Xiaoyu Zhang;Jtmshi Yazaki;Ambika S Ge-nome-wide high-resolution mapping and functional a-nalysis of DNA methylation in Arabidopsis[外文期刊] 2006(06) 25.Sijen T;Fleenor J;Simmer F On the role of RNA am-plification in dsRNA-triggered gene silencing[外 文期刊] 2001 26.赵明敏;赵建;郭永清 RNA干扰及其在植物研究中的应用[期刊论文]-农业生物技术学报 2006(4) 27.Minsung Kim;Wynnelena Canio;Sharon Kessler Developmental changes due to long-distance move-ment of a homeobox fusion transcript in tomato[外文期刊] 2001(13) 28.Voiunet O;Vain P;Angell S Systemic spread of sequence-specific transgene RNA degradation in plants is initiated by localized introduction of ectopie promoter-less DNA 1998 29.Lucas W J;Yoo B C;kragler F RNA as a long-dis-tance information macromolecule in the plants[外文 期刊] 2001(11) 30.Berntein E;Candy A A;Hamond S M Role for a bidentate ribonuclease in the initiation step of RNA in-terference[外文期刊] 2001 31.Schiebel W;Haas B;Marinkovic S RNA-di-rected RNA polymerase from tomato leaves.I.Purifica-tion and physical properties 1993 32.Michael W;Gabi K Nomenclature and functions of RNA-directed RNA polymerases[外文期刊] 2006(3) 33.Ceruttl L;Mian N;Bateman A Domains in gene silen-cing and cell differentiation proteins:The novel DAZ do-main and redefinition of Piwi domain[外文期刊] 2000(10) 34.Carmell M A;Xuan Z;Zhang M Q The Argonaute family:Tentacles that reach into RNAi,developmental control,stem cell maintenance,and tumorigenesis 2002 35.Facard M;Boutet S;Morel J B AGO1,QDE-2 and RDE-1 are related proteins required for posttranscriptional gene silencing in plants,quelling in fun-gi,and RNA interference in animas[外文期刊] 2000(21) 36.Parrish S;Fire A Distinct roles for RDE-1 and RDE-4 during RNAs interference in Caenorhabditis elegans 2001 37.Wesley S V;Helliwell C A;Smith N A Construct design for efficient effective and high-throughput gene silencing in plants 2001 38.Fraser A G;Kamath R S;Zipperlen P Functional-genamic analysis of C.elegans chromosome I by systemic RNA interference[外文期刊] 2000 39.Schob H;Kunz C;Meins F J Silencing of transgenes in-troduced into leaves by agroinfihration:A

simple,rapid-method for investigating sequence requirements for gene silencing[外文期刊] 1997 40.Erik Limpeus;Javier Ramos;Carolien Franken RNA interference in Agrobacterium rhizogenes-transformed roots of Arabidopsis and Medicago truneatula[外文期刊] 2004 41.Peele C;Jordan C V;Muangsan Silencing of a meristematic gene using gemini virus-derived vectors [外文期刊] 2001(4) 42.Zeynep Arziman;Thomas Horn;Michael Boutros E-RNAi:a web application to design optimized RNAi constructs[外文期刊] 2005 43.Thomas Horn;Zeynep Arziman;Juerg Berger Genome RNAi:a database for cell-based RNAi pheno-types 2006 44.Olson A;Sheth N;Lee J S RNAi Codex:a per-tal/database for short-hairpin RNA(shRNA) gene-silencing constructs[外文期刊] 2006 45.Kristin C Gunsalus;Wan-Chen Yueh RNAiDB and PhenoBlast:web tools for genome-wide phenotypic mapping projects[外文期刊] 2004(1) 46.Andreas Henschel;Frank Buchholz;Bianca Habermann DEQOR:a web-based tool for the design and quality control of siRNAs[外文期刊] 2004(zk) 47.Daisuke Miki;Ko Shimamoto Simple RNAi vectors for stable and transient suppression of gene function in rice[外文期刊] 2004 48.Guo H S;Fei J F;Xie Q A chemical-regulated inducible RNAi system in plants[外文期刊] 2003(3) 49.Zhaosheng Li;Meina Y A novel nuclear-localized CCCH-type zinc finger protein,OsDOS,is involved in delaying leaf senescence in rice[外文期刊] 2006 50.Papon N;Vansin A;Gantet P Histicline-contai-ning phosphotransfer domain extinction by RNA interfer-ence turns off a cytokinin signaling circuitry in Cathatan-thus roseus suspension cells 2004 51.Koga A;Ishibashi T;Kimura S Characterization of T-DNA insertion mutants and RNAi silenced plants of Arabidopsis thaliana UV-damaged DNA binding pro-tein 2(AtUV-DDB2)[外文期刊] 2006 52.Zhang Liangran;Tao Jiayi;Wang Shunxin The rice OsRad21-4,an orthologne of yeast Rec8 protein,is required for efficient meiosis[外文期刊] 2006 53.Jensen P E;Haldrup A;Zhang S The PSI-O subunit of plant photosyststem I is involved in balancing the excitation prossure between two photosystems[外文期刊] 2004 54.Ketelaar T;Allwood E G;Anothony R The actin-interacting protein AIP1 is essential for aetin organiza-tion and plant development[外文期刊] 2004(02) 55.Stevens R;Grelou M;Vezon D ACDCA5 homolog in Arabidopsis is essential for meiosis,as shown by RNA interference-induced gene silencing[外文期刊] 2004(01) 56.Daisuke Miki;Rika Itoh;Ko Shimamoto RNA silencing of single and multiple members in a gene family of rice 2005 57.Senthil Subramanian;Madge Y Graham RNA in-terference of Soybean is oflavone synthase gene leads to silencing in tissues distal to the transformation site and euhanced susceptibility to Phytophthora Sojae[外文期刊] 2005(04)

58.李小平;马嫒嫒;李鹏丽 利用RNA干扰敲减rlpk2基因的表达可以延缓大豆叶片衰老[期刊论文]-科学通报 2005(50) 59.Hirotaka Kumagai;Eri Kinoshita;Robert W RNAi knock-down of ENOD40s leads to significant suppression of nodule Formation in Lotus japonicus[外文期刊] 2006(08) 60.Alice A Chen;Austin M Detfus;Salman R Quantum dots to monitor RNAi delivery and improve gene silencing[外文期刊] 2005(22) 61.Pinto Y M;Kok R A;Bandcombe D C Resistance to rice yellow mottle virus(RYMV) in cultivated African rice varieties containing RYMV transgenes[外文期刊] 1999(7) 62.Abbott D;Wang M B;Waterbouse P A A single copy of a virusdetived transgene encoding hairpin RNA gives im-munity to barley yellow dwarf virus[外文期刊] 2000(06) 63.Teullado F;Martinez-GarciaB;Vargas M Crude extracts of bacterially expressed dsRNA can be used to protect plants ngainst virus infections 2003(01) 64.Ramanjuh S;Jian-kang Zhu Novel and stress-regu-Tated microRNAs and other small RNAs form Arabidop-sis[外文期刊] 2004(8) 65.Farina K;Guy Charles L RNA interference of Arabidop-sis beta-amylase 8 prevents maltese accumulation upon cold shock and increase sensitivity of PSII photochemical efficiency to freezing stress 2005(44) 66.Guiliang Tang;Gad Galili Using RNAi to improve plant nutritional value:from mechanism to application 2004(09) 67.李加瑞;赵伟;李全梓 Waxy基因的RNA沉默使转基因小麦种子中直链淀粉含量下降[期刊论文]-遗传学报 2005(08) 68.Kusaba M;Miyahara K;Iida S Low glutelin con-tent1:a dominant mutation that suppresses the glutelin multigene family via RNA silencing in rice 2003 69.Chics-Fen Chuang;Meyerowite E M Specific and her-itable genetic interference by double stranded RNA in Arabidopsis thaliana[外文期刊] 2000(9) 70.Mcilan R;Branner A M;Skinncr J S Modifica-tion of flowering intransgenic trees 2001 71.Satoru M;Daisuke M;Masahiro A RNAi-media-ted Silencing of OsGEN-L(OsGEN-ilke),a new member of the RAD21XPG nuclease family,canse male sterility by defect of microspore development in rice[外文期刊] 2005 72.M Clure B A;Hating V;Ebort PR Style self-in-compatibility prouduets of Nicotiana slats are ribonucle-ases[外文期刊] 1989 73.OBrien M;Kapfer C;Major G Molecular analysis of the stylar-expressed Solanum ehacoense small aspar-agines-rich protein family related to the HT modifier of gametophy self-incomputibility in Nicotiaaa[外文期刊] 2002(06)

本文读者也读过(7条) 1. 马超.郝青南.马兵钢.MA Chao.HAO Qing-nan.MA Bing-gang RNA干扰在植物中的作用机理及其应用研究进展[期 刊论文]-西北植物学报2008,28(9)

2. 王雷.种康.许智宏 植物功能基因组学研究的有效工具--RNAi技术[期刊论文]-植物生理学通讯2003,39(6) 3. 侯义龙 RNA干扰及其在植物上的应用研究进展与展望[期刊论文]-信阳师范学院学报(自然科学版)2010,23(2) 4. 白描.杨国顺.陈石.张美玲.Bai Miao.Yang Guoshun.Chen Shi.Zhang Meiling 植物RNAi的特点及其应用研究进 展[期刊论文]-生物技术通报2009(8) 5. 李卉.武天龙.LI Hui.WU Tian-long RNA干扰及其在植物代谢工程中的应用[期刊论文]-中国生物工程杂志 2007,27(10) 6. 白描.杨国顺.陈石.张美玲.Bai Miao.Yang Guoshun.Chela Shi.Zhang Meiling 植物系统性RNAi的研究进展[期 刊论文]-基因组学与应用生物学2009,28(3) 7. 陈李淼.赵琳.郝迪萩.李文滨.CHEN Limiao.ZHAO Lin.HAO Diqiu.LI Wenbin 植物中RNA干扰技术的研究与应用 [期刊论文]-东北农业大学学报2009,40(10)

引证文献(8条) 1.杨少华.王丽.王一帆.王林嵩 萝卜过氧化物酶RNA干扰载体的构建及鉴定[期刊论文]-西北农业学报 2010(1) 2.魏益凡.马建.付永平.王丕武 抑制大豆Le1基因表达的RNAi载体构建[期刊论文]-吉林农业科学 2010(3) 3.刘乐承.林小芳 紫菜薹BcMF4基因的克隆及其RNAi植物表达载体的构建[期刊论文]-长江大学学报(自科版)农学 卷 2010(4) 4.刘乐承.林小芳 紫菜薹BcMF4基因的克隆及其RNAi植物表达载体的构建[期刊论文]-长江大学学报(自科版)农学 卷 2010(4) 5.刘爱玲.邹杰.王文芳.周小云.张先文.陈信波 水稻OsHsfA7基因RNA干扰载体的构建及遗传转化研究[期刊论文]核农学报 2010(2) 6.孙辉.祝建波 利用简并引物克隆天山雪莲sikPIP基因片段及RNAi载体的构建[期刊论文]-生物技术通报 2010(6) 7.阴志刚.祝建波 天山雪莲根边缘细胞特异蛋白BCsp基因的克隆及转化[期刊论文]-西北农业学报 2011(3) 8.张森浩.严学兵.王成章.文开新.许来俊 RNA干扰及其在植物中的研究进展[期刊论文]-草业科学 2011(5)

本文链接:http://d.g.wanfangdata.com.cn/Periodical_zgylzwxb200802024.aspx


相关文章:
RNA干扰技术的研究进展.pdf
RNA干扰技术的研究进展 - 中国药理学通报 Ch inese Pha r m
植物RNA干扰技术的研究进展及应用前景_论文.pdf
植物RNA干扰技术的研究进展及应用前景 - 工作研究 农业 开 发与装 各 2017年第5 期 植物R NA 干扰技术 的研 究进 展及应用前景 张蕾 (沈...
RNA干扰技术的研究进展.pdf
RNA干扰技术的研究进展_生物学_自然科学_专业资料。生物技术 世界 学术论坛 RNA...该小组将这一现象称为RNA干扰。 不断的研究发现 RNA干扰现象广泛存在于植物、 ...
RNA干扰技术的研究进展_徐俊.pdf
RNA干扰技术的研究进展_徐俊 - 医药生物技术 RNA干扰技术的研究进展 徐俊 毛颖 苗荻 郝佳 国家知识产权局专利局专利审查协作北京中心 【摘要】 RNA干扰是一种由双...
RNA+干扰的研究进展(生命科学研究)2014.pdf
RNAi 广泛存在于真菌、植物和动物中,这种调控可以由 siRNA、shRNA 及 关键词:RNA 干扰;小分子 RNA;研究进展 进行了综述。 要:RNA 干扰(RNA interference, RNAi...
RNA干扰研究进展.pdf
RNA干扰研究进展 - RNA 干扰研究进展 谢克亮 1 王世平 1 赵长安 2
RNA干扰载体构建方法的研究进展.pdf
连接”方法构建RNA干扰载体 是最原始的构建方法,虽然成功地构建了多个植物 RNA干扰表达载体,但其过程相对比较繁琐,受到 限制因素也比较多,不适合做高通量的研究...
基因沉默的工具-RNA+干扰技术的研究进展_图文.pdf
基因沉默的工具-RNA+干扰技术的研究进展_生物学_自然科学_专业资料。基因表达...1990年, Jorgensen 的实验室 为使矮牵牛花的紫色花色加深而在植物中大量引入了...
植物RNA干扰的研究进展_论文.pdf
植物RNA干扰的研究进展 - RNA干扰(RNA interference,RN
RNA干扰的研究进展_何洁凝.pdf
RNA干扰的研究进展_何洁凝 - 第 18 卷第 3 期 2014 年 6 月
细胞核内RNA干扰途径研究进展.pdf
细胞核内RNA干扰途径研究进展 - 生 物 技 术 通 讯 LETTERS IN
植物小RNAs的研究进展_图文.pdf
植物RNAs的研究进展 - 生物技术通报 ?综述与专论? B10TECHNOLOGYBULLETIN2009年第8期 植物RNAs的研究进展 谢兆辉 (德州学院生物系,德州253023...
RNA干扰及其在植物上的应用研究进展与展望_论文.pdf
RNA干扰及其在植物上的应用研究进展与展望 - RNA干扰是21世纪的研究热点之一,该技术目前已经在植物的基因组功能分析、抗病性的研究以及生长发育的调控等方面得到应用...
RNA干扰载体构建方法的研究进展.pdf
生物技术 RNA 干扰载体构建方法的研究进展粟 2 2 2 挺 1, , 刘爱玲 1...Key words: RNA-interference; vector construction; gene; summary 随着模式植物...
植物中RNA干扰技术的研究与应用.doc
植物RNA干扰技术的研究与应用 - 植物RNA 干扰技术的研究与应用 摘要: RNA 干扰( RNA interference, RNAi) 是双链 RNA 诱导的转录后基因沉默。RANi...
RNA干扰及其在植物中的应用进展_论文.pdf
RNA干扰及其在植物中的应用进展 - RNA干扰(RNA interference,RNAi)是双链RNA诱导的基因沉默现象,RNA干扰现象是在线虫中首次发现的,它广泛存在于生物体中(包括单...
植物RNA干扰表达载体构建方法的研究.pdf
植物RNA干扰表达载体构建方法的研究_农学_高等教育_教育专区。植物RNA干扰表达载体构建方法今日推荐 157份文档 2015国家公务员考试备战攻略 ...
RNA干扰及其在植物研究中的应用_王婷婷.pdf
BIOTECHNOLOGY 生物技术通报 BULLETIN 2013年第3期 RNA 干扰及其在植物研究中的应用王婷婷1 王丹丹1 Rahman Laibi Chelab1 康丹1 游腾飞1 眭安平2 杨星勇1 (...
RNA干扰的研究现状与应用前景.pdf
RNA干扰的研究现状与应用前景 - 大理学院学报 JOURNAL OF DALI
RNA干扰技术研究新进展.pdf
RNA干扰技术研究进展 - 3 ! . 重庆医学 & ! ! 年 % 月第 . & 卷第 3 期 ! 综 !! 述 ! H ]) 干扰技术研究进展 赵震宇 综述 ! 张 ! 铀 ...
更多相关标签: