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遗传学实验


word 文档,知识的海洋,下载可编辑! 遗传学实验 目 录 实验一 实验二 有丝分裂(Feulgen 染色)制片技术 减数分裂制片技术 附:临时制片与永久制片技术 3 7 实验三 实验四 实验五 实验六 实验七 实验八 实验九 实验十 果蝇的形态、生活周期及饲养 果蝇的伴性遗传 果蝇的唾腺染色体制片技术 粗糙链孢霉的杂交 染色体数目变异 染色体结构变异 诱变物质的微核测定 基因分离的验证 11 16 20 23 27 29 33 34 37 40 42 45 48 51 54 实验十一 自由组合规律的验证 实验十二 人类 ABO 血型检查 实验十三 人类 X 染色质的观察 实验十四 小白鼠骨髓细胞染色体制片技术 实验十五 小白鼠骨髓细胞染色体显带(C带)技术 实验十六 人体外周血淋巴细胞培养及染色体制片 实验十七 人类染色体核型分析 word 文档,知识的海洋,下载可编辑! 实验十八 植物染色体组型分析 实验十九 植物染色体显带技术和带型分析 实验二十 同功酶遗传标记分析 实验二十一 荧光原位杂交实验 附录一:X2 测验表 57 61 65 70 75 word 文档,知识的海洋,下载可编辑! 实验一 有丝分裂(Feulgen 染色)制片技术 一、实验目的 1、通过本实验的学习,初步掌握植物染色体制片,奠定细胞遗传学研究的 基本技术; 2、通过对植物根尖细胞的观察,掌握有丝分裂过程中染色体的形态特征和 动态变化; 3、掌握 Feulgen 染色方法。 二、基本原理 有丝分裂(mitosis)是植物细胞分裂的主要方式,细胞分裂过程中,核内 染色体准确地复制,并有规律地、均匀地分配到两个子细胞中去,保证了植物细 胞的遗传性状的一致。各种生长旺盛的植物组织中,如根尖组织、茎尖组织、居 间分生组织、愈伤组织等,每天都有分裂高锋时间,此时经预处理,固定、解离、 染色和涂抹压片等方法, 在显微镜下可以观察到处于有丝分裂各时期的细胞和染 色体。 孚尔根染色法是鉴别细胞中 DNA 反应的组织化学方法。细胞内的 DNA(通常 位于核及染色体上)在 1N HCl 60℃水解时部分地破坏了脱氧核糖与嘌呤碱之间 的糖苷键而使嘌呤碱脱掉, 从而使脱氧核糖的第一个碳原子上潜在的醛基获得了 自由状态。而无色的亚硫酸品红是由偏重亚硫酸钠、盐酸和碱性品红配制成的。 偏重亚硫酸钠与盐酸能产生亚硫酸根, 当具有醌式结构的碱性品红分子与亚硫酸 根结合后,醌式结构的共轭双键被打开,碱性品红变为无色。当用这种无色的亚 硫酸品红去染经酸解的细胞时,就会与染色体 DNA 上游离的醛基结合,又出现了 呈现红色的醌式结构,从而使 DNA 分子着色。这一反应是 1924 年由 Feulgen 和 Rossonbek 所发现和确定的,已广泛用作鉴别 DNA 的一种特异性检查方法。 三、材料和器材 1、实验材料: 蚕豆 (Vicia faba, 2n=12) (或其它植物) 干种子; 洋葱 (Allium cepa, 2n=16) 根尖。 word 文档,知识的海洋,下载可编辑! 2、实验仪器及用具: 水浴锅(60℃水浴)、显微镜、培养箱、电子天平、酒精灯、100℃温度计、 具塞试管、吸管、滤纸条等。 3、药品和试剂: 卡诺氏固定液(冰醋酸:无水酒精=1:3) 、秋水仙碱(或 8-羟基喹啉) 、无 水乙醇、1N HCl、 45?醋酸、0.2?秋水仙素、碱性品红、偏重亚硫酸钠(钾) Schiff 试剂的配制 Schiff 试剂:即脱色亚硫酸品红。溶解 1g 碱性

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