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RNA干扰


RNA 干扰-是指一种分子生物学上由双链 RNA 诱发的基因沉默现象, 其机制是通过阻碍特定基因的转译或转录来抑制基因表达

RNA 干扰-是指一种分子生物学上由双链 RNA 诱发的基因沉默现象,其机制是 通过阻碍特定基因的转译或转录来抑制基因表达。当细胞中导入与内源性 mRNA 编码区同源的双链 RNA 时,该 mRNA 发生降解而导致基因表达沉默。 学术术语来源--Cx43 基因干扰对鼠胎肝干细胞培养的优化效应 文章亮点: 1 来自胎肝的干细胞已被证实具有分化成肝细胞和胆管细胞的能力, 作为种子 细胞移植有望成为治疗急性失代偿性肝脏疾病和先天性肝脏代谢缺陷性疾病 的有效手段。但干细胞治疗仍面临很多难题:如何快捷、有效地提取,高效增 殖及诱导分化一直是科研工作者努力的方向。 2 实验通过沉默 RhoA 基因的方法促进胎肝干细胞增殖,优化胎肝干细胞的培 养方法,旨在为干细胞移植的进一步研究搭建了良好的平台。 关键词:

干细胞;胚胎干细胞;连接蛋白 43;基因干扰;鼠胎肝干细胞;细胞增殖; 细胞周期
主题词:

肝细胞;连接蛋白 43;RNA,小分子干扰;细胞增殖
摘要 背景:胎肝干细胞具有分化成肝细胞、胆管细胞的潜能,参与肝脏的修复与重 建,是肝细胞的重要来源,但是人体的胎肝干细胞含量极少,如何获取一定数 量和较高纯度的胎肝干细胞是目前研究的热点。 目的:构建能有效抑制大鼠胎肝干细胞 Cx43 基因表达的 siRNA 载体,探讨抑 制 Cx43 表达对体外培养的鼠胎肝干细胞增殖及细胞周期的影响。 方法:体外培养鼠胎肝干细胞,设计及合成靶向 Cx43 的 siRNA 序列 (Cx43-siRNA)以及阴性对照序列(NC-siRNA),采用电转法转染大鼠胎肝干细 胞, 即为实验组和对照组, 未转染的胎肝干细胞为空白组。 应用 real-time PCR 和 Western blot 法检测转染前后鼠胎肝干细胞 Cx43 基因和蛋白的表达;细胞 生长曲线、CCK-8 法观察细胞生长增殖情况;流式细胞术测定细胞周期分布的 变化。 结果与结论:转染 Cx43-siRNA 后,实验组与对照组、空白组相比 Cx43 基因和

蛋白水平表达均明显降低,细胞的生长速度明显增快,G0/G1 期细胞减少,S 期 细胞数增多,差异有显著性意义(P < 0.05),结果表明通过电转法转染靶向 Cx43 的 siRNA 能促进体外培养的鼠胎肝干细胞增殖,对其培养有优化作用。 中国组织工程研究杂志出版内容重点:干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂 肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞 分化;组织工程


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