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生化实验室常用试剂配方


PBS:我们去买复合片,直接配制。

试剂名称:4%多聚甲醛-磷酸二氢钠/氢氧化钠:40ml 500ml 配方
所需药品及剂量:A 液:多聚甲醛 20g B 液:Na2HPO4· 2O 2H C 液:NaOH 操作过程 A 液最好在 500ml 的三角烧瓶中加热配制(低温比较难溶) ,至多聚甲醛完全溶解后冷却待 用。注意,在溶解多聚甲醛时,要尽量避免吸入气体或溅入眼内。B 液和 C 液配制好后, 将 B 液倒入 C 液中,混合后再加入 A 液,将 pH 调至 7.2~7.4,最后,补充蒸馏水至 500ml 充分混合。 或者将多聚甲醛 20g、Na2HPO4· 2O 3.44g、NaOH 1.93g 直接溶于 500ml 蒸馏水,将 pH 2H 调至 7.2~7.4 即可。 溶于 200ml 蒸馏水 3.44g 溶于 150ml 蒸馏水 1.93g 200ml 蒸馏水

5× Tris-硼酸(TBE)缓冲液(配制 1L 溶液各成分的用量) Tris 碱 硼酸 EDTA 54 g

27.5 g
2.92 g

实际配 500ml,那么 Tris 碱 27g, 硼酸 13.75g,EDTA 1.46g

Western bloting
10%分离胶(两块胶,15ml ) 超纯水 40%Acr/Bic (37.5:1) LT 10%AP TEMED 6ml 5.25ml 3.75 80 ?l 7.6 ?l 4%浓缩胶(两块胶,5ml) 超纯水 40%Acr/Bic (37.5:1) HT 10%AP TEMED 3.2ml 0.55ml 1.25 50 ?l 12.5 ?l

Running buffer (1×): Trisbase 3.03g; Glycine 18.8g;

SDS1.0g 加水至 1L 可以配成 5×(5×电泳缓冲液配方:总量为 1L;15.1g Tris 碱;72.0g 甘氨酸;5.0g SDS)

Transfer Buffer (1×): 甘氨酸 2.9g Tris(MW121.14) 5.8g SDS 0.37g 甲醇 200ml,加蒸馏水至 1000ml 溶解后 4℃保存,溶液可重复使用 2-3 次。 (可以配制成 10×Transfer Buffer 进行保存,稀释 10 倍使用,再加甲醇)

TBS 缓冲液(1×): 1 mol/L Tris·HCl(pH7.5) 10ml NaCl 8.8g 蒸馏水至 1000ml (可以配制成 10×TBS 缓冲液进行保存,稀释 10 倍使用)

TBS 配方(10*) : Tris 12.1g, NaCl 88 g 蒸馏水至 1000ml + 6ml 浓 HCl

TBST 配方:按照 1:1000 体积比例加入 Tween 20。

封闭液(5%) 脱脂奶粉 5g 溶于 TBST 100ml :

4×Lower Tris, 500ml:90.83g Tris base,20ml 10%SDS,adjust PH to 8.8(浓盐酸 12ml) 4×upper Tris, 200ml:12.12g Tris base,8ml 10%SDS,adjust PH to 6.8(浓盐酸 8ml)


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