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生物化学实验课程教学大纲


生物化学实验课程教学大纲
课程名称: 英文名称: 学 时: 开课学期: 适用专业: 课程类别: 课程性质: 先修课程: 教 材: 生物化学实验 课程编码: 其中必做: 64 学 分: 0830531 2

Experiment of Biochemistry
64 3 生物技术/生物工程 必修 专业基础课

化学实验
生物工程与技术专业基础实验教程

一、课程性质及任务
《生物化学实验》是和《生物化学》课程同时开设的实验课程,是理论教学的深化和补 充,具有较强的实践性,是一门重要的技术基础课,可作为生物技术、生物科学、生物工程 药学专业学生的必修课。 生命学院的学生应该掌握生物化学实验的基本知识和基本技术技能,包括生物化学分 离、制备、分析和鉴定技术(如滴定、比色、层析、电泳技术) ,同时掌握各种仪器的使用。 随着生物化学的飞速发展, 新的实验方法和技术不断出现。 还要掌握一些较新的和实用的技 术技能,如一些分子生物学的基础实验等。通过该课程的学习,使学生巩固和加深生物化学 理论知识,通过实践进一步加强学生分析问题和解决问题的能力及设计和创新能力的培养, 培养学生一定的科学研究能力和严谨的科学态度, 为学生进入更高层次的生物化学乃至分子 生物学实验打下基础。

二、课程的教学要求
实验课程内容分三个层次:基础实验、综合设计性实验和设计性实验。基础实验是一些 加强学生基本实验技能训练的传统实验。 综合设计实验包括一些新近发展起来的生化实验技 术。设计性实验由学生自拟题目,自选仪器,独立设计实验。并对一些实验内容进行系统的 优化组合。经过多层次的训练后,学生应达到下列要求: 1.进一步巩固和加深对生物化学基本知识的理解,掌握生物化学实验的基本知识和基 本操作技能。如生物化学分离、制备、分析和鉴定技术。 2.提高观察问题、分析问题和解决问题的能力。通过独立思考,深入钻研有关问题, 具有初步解决生物化学实验问题的能力。 3.能正确使用仪器设备,掌握仪器操作原理。 4.能独立设计实验,利用所学知识准确分析实验结果。 5.课前做好预习,课后认真做好实验报告,准确分析实验结果。

三、实验项目与学时分配

序 号 1

项目 氨基酸的分离鉴定 ---纸层析法 大豆蛋白的提取及 浓度测定 SDS-PAGE 测蛋白 质分子量 大肠杆菌 DNA 和 RNA 的同步提取 法 维生素 C 的定量测 定 还原糖和总糖含量 的测定 黑木耳多糖的提 取、分离、纯化及 初步测定 酶联免疫吸附测定 糖的定量测定 脂肪的提取及测定 脂肪碘值的测定 去污剂及膜活性试 剂对红血球细胞膜 的作用 蛋白质和氨基酸的 呈色反应 糖的呈色反应和还 原糖的鉴定 蛋白质浓度测定总氮量的测定

内容提要 通过氨基酸的分离 , 学习纸 层析法的基本原理及操作 方法 学习大豆蛋白的提取及含 量测定 学习 PAGE 法测蛋白质分 子量的方法 学习碱裂解细胞,提取核 酸的基本操作方法,掌握 琼脂糖电泳技术 用染料 2,6-二氯酚靛酚测 定蔬菜或水果中维生素 C 的含量。 学习 3,5-二硝基水杨酸比 色定糖法

学时 8

性质 验证

要 求 必做

2 3 4

8 8 8

验证 验证 验证

必做 必做 必做

5

8

验证

必做

6 7

8

验证 综合

必做 必做

通过水提法浸提出木耳中 8 的多糖,并测定多糖组成、 含量 学习酶联免疫吸附法测定 抗体或抗原 用分光光度法测定淀粉含 糖量 索式提取法 使用 IBr 进行碘值测定 1.制备红血球 2.测量多种去污剂对细胞膜 溶解作用 用各种试剂对比蛋白质和 氨基酸各种鉴定方法的特 点和用途 鉴定糖类及还原糖及区分 酮糖和醛糖 1、 凯氏定氮法测定脂肪酶 蛋白含量。 2、通过测定脂肪酶的水解 能力来了解酶活力和比活 性。 用醋酸纤维素薄膜电泳技 术分离血清蛋白 1、 用聚丙稀酰胺凝胶垂直 板电泳技术分离血清蛋 8 4 4 4 4

8 9 10 11 12

综合 验证 验证 验证 演示

必做 选做 选做 选做 选做

13

6

验证

选做

14 15

4 8

验证 验证

选做 选做

16 17

血清蛋白醋酸纤维 素薄膜电泳 聚丙稀酰胺凝胶垂 直板电泳分离血清

4 8

验证 验证

选做 选做

蛋白

白。 2、 通过和前一种方法的比 较加深对电泳技术的了 解。 1、通过对树脂的处理、装 6 柱、 加样、 洗脱技术的学习, 掌握层析技术。 2、用层析技术分离四种单 核苷酸。 用紫外分光光度法测定核 酸含量。 用碱裂解法进行质粒 DNA 的分离、纯化。 用琼脂糖凝胶技术分离 DNA。 掌握激活剂和抑制剂对酶 促反应速度的影响。 4 4 4 6 验证 选做

18

离子交换柱层析分 离核苷酸

19 20 21 22 23 24

核酸浓度测定-紫 外线(uv)吸收法 质粒 DNA 的微量 制备(碱裂解法) DNA 的琼脂糖凝 胶电泳 酶的性质实验 酶的性质实验 温度对酶活性的影 响 猪脾 DNA 的提取 及测定 酵母 RNA 的提取 测定 二苯胺显色法测 DNA 酵母 RNA 水解产 物分析 蔗糖酶的分离提取

验证 验证 验证 验证 验证 验证

选做 选做 选做 选做 选做 选做

用不同酶作用于不同底物, 4 了解酶的专一性。

1.了解温度对酶促反应速 4
度的影响。

2.测定酶最适温度。
25 26 1、 学会 SDS 提 DNA。 2、 DNA 含量的测定 3、 学会 SDS 提 RNA。 4、 RNA 含量的测定。 学习定性测定 DNA 的方法 1. 了解 RNA 水解方法 2. 掌握定性测 RNA 水解 产物技术 1、 学习蔗糖酶分离提取的 方法。 2、 有机溶剂分级及柱层析 技术。 1、 学习正交试验设计法的 使用。 2、 求出蔗糖酶的最适温度 及最适 PH 值。 了解底物浓度与酶反应速 度之间的关系,学习蔗糖酶 米氏常数的测定方法。 4 4 验证 验证 选做 选做

27 28

6 6

验证 验证

选做 选做

29

3

验证

选做

30

用正交试验设计法 测定几种因素对蔗 糖酶活性的影响 蔗糖米氏常数设定

8

验证

选做

31

3

验证

选做

32 33

肌糖原的酵解作用 单向定量免疫电泳

学习检定糖酵解作用的原 理和方法。 1、 学习免疫电泳的原理 和方法。 2、 掌握单向定量免疫电 泳的方法。 1. 学习蛋白的提取与纯 化的原理和方法。 2. 熟练掌握 SDS-PAGE 的技术。 植物色素的提取与分离

3 6

验证 验证

选做 选做

34

种子储存蛋白 的 提 取 纯 化 与 SDS-PAGE 设计性实验

8

验证

选做

35

4

设计

选做

注:项目性质:演示、验证、综合、设计、创新 项目要求:必做、选做

四、考核及成绩评定
1、考核方式:操作 2、考核标准及比例: 实验课程采用平时考核,期末考试,综合评定学生成绩。平时实验占 80%,期末考核 占 20%。每个实验,预习报告占 30%,实际操作 40%,总结报告 30%。 实验成绩分:优、良、中、及格、不及格五级。 注:实验考核成绩达不到 60%,不允许参加理论考试。

五、主要参考书 教材:生物技术实验设计与研究,自编讲义 参考书: 生物化学与分子生物学实验教程,主编梁宋平, 高等教育出版社, 2003 年3月
制定人:于源华、何秀霞、果洪宇 审定人:李景梅 批准者:黄丹飞 2008 年 8 月


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