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遗传学实验(梁)


一. 填空 1.有丝分裂的观察实验中,我们的实验材料及其部位是大蒜根尖。秋水仙素:阻止纺锤体的活动以获得较多中期分裂相。卡诺氏固定液, 现配现用,无水乙醇:冰醋酸=3:1.改良苯酚红染色,紫色。 2.有丝分裂制片过程中盐酸解离的作用是:杀死细胞,促使细胞分散开来,便于观察 3.减数分裂的观察实验中, ,我们的实验材料及其部位是大葱花药。 4.制备果蝇的唾腺染色体要用果蝇的三龄幼虫时期。麻醉果蝇所用试剂是乙醚。 5.果蝇唾腺染色体有如下特征:巨大、体细胞配对、形成染色中心、具有深浅不同疏密相间的横纹。 6.果蝇唾腺染色体上的异染色质(如着丝粒等)集中的区域聚集在一起形成染色中心;染色体臂上有深浅不同、宽窄不一的横纹。 7.剥离唾腺注意事项: 。①用力拉时不要停留和挪动针头②小心剔除脂肪体③清洗幼虫身上的培养基④选发育良好的幼虫 8.染色体组型分析中,臂比值是指长臂与短臂相对长度之比。 9.对染色体组型分析时根据臂比可以将染色体分为四种类型:中间着丝粒染色体、近中着丝粒染色体、近端着丝粒染色体及端部着丝粒 染色体。 10.有丝分裂制片过程中用秋水仙素对大蒜根尖进行预处理,处理时间为 2-4 小时,其作用是使染色体加倍,抑制纺锤体形成;在多倍体 诱发实验中用同样的试剂处理了 48 小时。 11.果蝇杂交为什么要选处女蝇?雌果蝇生殖器官有受精囊,可保存交配所得的大量精子,能使大量的卵细胞受精,为保证实验结果的可 靠性,所以选处女蝇。 12.请问解离与软化的目的是什么?可以分解细胞之间的果胶层,并使细胞壁软化,细胞容易彼此散开,有利于染色和压片。 13.为保证染色的充分要注意哪些问题?室温、酒精灯烤片、染液量、染色时间。 14.压片时应注意的问题有哪些?①在盖玻片上覆以吸水纸,用左手压住盖玻片对角,右手拿铅笔垂直敲盖玻片几下,用力均匀②保证两 玻片不错边③材料不能干④将材料压成薄薄一层 15.减数分裂过程中有哪些重要的遗传学事件发生 同源染色体联会、交换、分离,非同源染色体之间自由组合通过染色体的规律性变化,最终产生四个子细胞内染色体数目只有母细胞的 一半。 16.麻醉果蝇:利用果蝇的趋光性和向上性将其引入麻醉瓶,用乙醚麻醉。 17.辨别果蝇雌雄:A 体型:大,末端尖;小,末端钝 B 腹部:背面环纹五节,无黑斑,腹片七节;背面环纹七节,延伸到末端呈黑斑, 腹片五节 C 第一对足:跗节基部无性梳,跗节基部有黑色鬃毛状性梳。 18.说明秋水仙素诱发多倍体的原理是什么?秋水仙素抑制细胞分列时纺锤体的形成,使染色体向两极的移动被阻止,而停留在分裂中期 的分布,这样细胞不能继续分裂,从而产生染色体数目加倍的核。 二. 问答 1.以大蒜为实验材料,写出进行多倍体细胞的诱发及鉴定的实验步骤,所用试剂和预期结果。 ⑴实验步骤:1、多倍体细胞的诱发:①培养根尖:将大蒜瓣放在盛有清水的培养皿中,让根部接触水,在 20~25℃光照下培养,让根尖 长到 0.5~1cm。②多倍体诱导:将水换成 0.1%的秋水仙素溶液,在暗处,20℃培养 48 小时左右。③固定:剪取根尖 1~2cm,冲洗后转移 至卡诺氏固定液中,室温下处理 3~8 小时。然后转入 70%乙醇中 4℃保存。2、多倍体细胞的鉴定:①解离:将冲洗后的根尖放入 1mol/L 的盐酸中,室温下处理 10~15min。②染色:切取 1mm 左右的分生区,用改良苯酚品红染液染色 10~20min③压片:盖上盖玻片,在酒精灯 上烤片。然后固定盖玻片,用铅笔垂直、用力敲击盖片几下,将材料压成一层细胞。④镜检:先在低倍镜下找到细胞,再换成高倍镜仔 细观察。 ⑵试剂:蒸馏水、卡诺氏固定液、45%醋酸、0.1%的秋水仙素溶液、改良苯酚品红染液1mol/lHCl、70%乙醇等。 ⑶预期结果 2..叙述用大葱花为材料进行减数分裂染色体制片的主要步骤? ① 取材:选取适当的花蕾是实验的关键,不同植物材料的取材时间有所不同。大葱要选取嫩绿饱满、总苞光滑的花蕾。②固定:将花序 总苞剥去,放入卡诺氏固定液中,室温下处理 3 小时后,经 95%乙醇洗后,于 70%乙醇中冷藏保存。③挤压花粉母细胞:冲洗后的花序取 上、中、下部各 2 个花蕾放在载玻片上,取出花药,用解剖针反复挤压花药,最后将药壁残渣去除干净。④染色:用改良苯酚品红染液 染色 10~15min。⑤压片:盖上盖玻片,在酒精灯上烤片。然后固定盖玻片,用拇指适当、均匀地压几下即可。⑥镜检:先在低倍镜下找 到细胞,再换成高倍镜仔细观察。 4.以纯合果蝇亲本为实验材料,论证自由组合定律。要求写出理论根据和实验步骤。 ⑴ 实验原理:位于非同源染色体上的两对基因,在减数分裂形成配子时可以自由组合;由于配子的随机结合,两对相对性状在杂种第二 代是自由组合的,呈现9:3:3:1的表型分离比。 ⑵实验步骤①选择处女蝇:将残翅果蝇与长翅果蝇培养瓶中羽化的成蝇全部杀死,选择羽化后 8 小时以内的果蝇为好。②杂交:长翅果 蝇和残翅果蝇杂交,正反交各做一瓶。23℃恒温培养。③移走亲本:待 F1 幼虫出现即可放掉亲本④观察 F1:观察 F1 的翅膀形态。

⑤F1 互交:在新培养瓶内,放入 3~5 对 F1 果蝇,培养。⑥移去 F1:待 F2 幼虫出现即可放掉并处死 F1 果蝇。⑦ 观察 F2:观察 F2 的翅 膀形态后处死,连续观察统计数据。⑧数据处理及统计分析:分析实验结果与预期理论的符合程度。 5. 三点测验的基因定位方法。 三点测交(2种亲本型配子+6种重组型配子,测交后产生8种表型) ,是基因定位的常用方法。 ⑴实验原理:位于同一条染色体上的基因称为连锁基因。同源染色体上的连锁基因之间会发生一定频率的交换,在子代中出现一定数量 的重组型。重组型子代的多少反映出基因间发生交换的频率的高低。基因在染色体上是呈直线排列的,基因间距离越远,发生交换的可 能性就越大,反之亦然。基因间的图距就是通过重组值的测定而得到的。 ⑵实验材料 :野生型和白眼、小翅、焦刚毛(三个基因为X连锁基因)突变型果蝇 ⑶实验步骤①选择处女蝇:收集突变型处女蝇②杂交:野生型雄蝇和突变型雌果蝇杂交4~6对,23℃恒温培养③移走亲本:待F1幼虫出现 即可放掉亲本。④观察F1:观察F1的形态⑤F1互交:在2瓶新培养瓶内,各放入5~8对F1果蝇,培养。⑥移去F1:待F2幼虫出现即可放掉 并处死F1果蝇。⑦观察测交子代:观察测交子代的类型、各类型的数目,连续观察统计数据⑧计算重组值:绘出连锁图。 ⑷注意事项:①将麻醉瓶清理干净;②尽量减少亲本的伤亡,注意麻醉程度,培养瓶的放置(水平) ,避免培养基过多失水③做好标记和 试验记录;④做好标记和试验记录; 7.区分花粉母细胞与花药壁细胞 ①花粉母细胞较大,一般是花药壁细胞的两倍以上②花粉母细胞第一次分裂后产生的二分子各呈半球 形,第二次减数分裂产生的四分子,各呈四分之一球形③减数分裂过程中花粉母细胞大小变化不大,可根据第二次分裂期的细胞大小确 认第一次分裂期的花粉母细胞④花粉母细胞外围较圆,基本看不到细胞壁,而花药壁细胞呈多边形,细胞壁清晰可见。 8.植物染色体制片及有丝分裂观察实验原理:植物的生长旺盛的分生组织(如根尖、茎尖、幼叶等)都在进行着有丝分裂。取这些组织 为材料,经过固定后迅速杀死细胞,并使细胞内的物质和生活状态得以保持,再经过解离、染色、压片等过程,在显微镜下就可以看到 大量处于有丝分裂各个时期的细胞,并进行染色体行为的观察。有丝分裂中期的染色体具有典型的形态特征,并容易计数。为了获得更 多的中期染色体装片,可以采用常用的药物处理方法,阻止纺锤体的形成,使细胞分裂停止在中期,便于进行观察。 9.果蝇的形态观察步骤①生活史②麻醉果蝇:利用果蝇的趋光性和向上性将其引入麻醉瓶,用乙醚麻醉。③辨别雌雄 A 体型:大,末端 尖;小,末端钝 B 腹部:背面环纹五节,无黑斑,腹片七节;背面环纹七节,延伸到末端呈黑斑,腹片五节 C 第一对足:跗节基部无性 梳,跗节基部有黑色鬃毛状性梳。④突变型的观察:有三种基因型的纯合体,突变性状表现在身体颜色(黑檀体、黑体、黄体灰身) 、翅 膀长度(残翅、长翅)、眼睛颜色(白眼、红眼) 、刚毛(焦刚毛、直刚毛)四个方面。先观察,后总结。 10.染色体组型分析:就是通过对染色体标本和其照片进行测量、对比分析、配对、分组、排列,对各染色体的形态进行分析。在细胞 遗传学、现代分类学、生物进化和遗传育种学等研究中,是重要的研究手段。 实验步骤:①测量:长臂、短臂及总长。 (如果染色体弯曲不能用直尺,可先用细线量取与染色体等长的长度,再量细线长度,着丝粒 应平分为二, 计入两条臂长度之内 ) ②计算: 根据测量结果, 计算出: 相对长度= (某染色体的长度/ 染色体组内全部染色体总长度)X100%. ③配对:根据测量、计算的数据进行同源染色体的配对。④排列和剪贴:将配对的染色体按由大到小的顺序进行排列并编号。等长的染 色体短臂长的排在前面,特殊的染色体(如性染色体)排在最后。让各对染色体的着丝粒排在一条直线上,短臂在上,长臂在下。⑤写 出核型公式


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