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温度对黄鳝消化酶活性的影响


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湖北农业科学

H B I A RC L U A  S IN E   N U E  G IU T R L CE C S  

文 章 编 号 :4 9 8  ( 05 0 — 12 0   0 3 — 14 2 0 )5 0 0 — 3 1

温度对黄鳝消化酶活性的影响 
陈  芳 , 扬代勤 , 国 良 严安 生  阮  ,
( 1长江大学  命科学学 院, 湖北 荆州 442 ; 3 0 5 2华中农 业大学水产学 院, 武汉 407 ) 3 0 0 

摘要 : 研究 了温度对黄鳝消化道 内蛋白酶 、 胰蛋 白酶 、 淀粉 酶和脂肪酶的活性影响 结果表 明, 温度会影 
响到黄鳝消化道 内消化 酶的活性 , 温度在 2 ~ 5 范 围内, 05 ̄ C 开始随着温度的升 高, 酶活性会逐渐增加 , 但  温度继续升高到一定值后 ,则会 逐渐 降低 。其蛋 白酶的适宜温度为 3 - 5C 5 4  ̄ ;胰蛋 白酶 的适宜 温度为  3 ~ 5 淀粉酶 的适宜温度为 3 - 0C; 5 4 ℃; 0 4  ̄ 脂肪酶 的适宜温 度为 2 - 5C   5 3  ̄。 关键词 : 黄鳝 ; 温度 ; 消化酶 
中图 分 类 号 :9 6 ;9 ; 4  ¥6. S 1 Q 8 4 1 文献标识码 :  A

消 化酶 的研 究 是 鱼类 营 养生 理 和 消 化 生 理 的 

胃 、 肠 、 肠 、 脏 的 消 化 酶 的 活性 影 响 , 了解  前 后 肝 以 黄 鳝 消 化酶 的理 化特性 , 究环 境 因 子对 黄 鳝 消 化  研 酶 的影 响  现将 结果 报道 如下 。  

重 要 研 究 内容 , 着 鱼类 营 养生 理 和 消 化生理 学 科  随
的 发展 ,国 内外对 鱼 类 消化 酶进 行 了大量 的研究 。  

近 年 国 内重 点 集 中对 鱼类 的消 化 道 及  化 腺 体 的  肖 消 化酶 种类 、 消化 酶 活性 分 布 及环境 因子 对 消化 酶  活性 的影 响进 行 了研 究 , 所研 究 的鱼类 包 括我 国主  要 淡 水养殖 品 种如 鲢 、 1 、 鱼 、 鱼 、 鱼 、 鱼  鳙 ,草 2 鲤 青 鳜 以 受海水 养殖 对 象如 对虾 、 纹盘 鲍 等 1 皱 0多  种 水 产动物 。如研 究 了鳜 鱼 、 鱼 、 鱼 、 鱼 、 鱼  青 鲤 草 鲫

1 材 料 与 方 法 
11 试 验材 料  .  

试验 用黄 鳝 取 自长 江 大学 黄 鳝 养殖 基 地 , 取  选

体质健壮 、 无病无伤 、 体重基本一致 的个体 , 均个  平
体 重 4 .g35g  28 ± . 。    
12 酶 分析样 品制备  .

和白鲢 的消化道各部位及肝脏 中消化酶活性 及其 
在肠 内的分 布 , 有人 研究 了温 度对草 鱼 、 还 白鲢 、 花  鲢 主要 消化 酶 活性 的影 响  国外对 鱼类 消 化酶 的 

将 活鳝 杀 死 , 即 解剖 , 速 取 出所 有 内脏 , 立 迅 置  于 冰 块 中 , 离 出肠 道 , 开 肠 道 , 分 为 两 段 , 分 剪 等 取  前 肠用 冰 冻 重蒸 水 冲洗 肠 内壁 , 经脱 脂 棉球 轻 轻 擦  拭 干 净后 , 下其 黏 膜  将 每 5 鱼 的黏 膜 合并 为  刮 尾


研 究 起步 较早 , 期 的研 究 主要 是研 究 消 化酶 在 各  早 消 化 器官 组织 中 的存在 与否 。Bacad18) 察  l hr(8 3观 n   到 两 鲱 等 9种 鱼 的 前 肠 具 有 蛋 白酶 ,t l g18) Se i (84  rn 报 道 了大 西 洋鲱 的幽 门垂 中 有 淀 粉酶 的存 在 ,   L (a(87发 现鲤 鱼 的 整 个消 化 道 中都 存 在 淀 粉  uhu18) 、 酶  随着 渔业 生 产 的发 展 和科 学技 术 的进 步 , 消  对
化酶 的研 究逐 渐深 入  K w i 9 2X 草 鱼在 不同食  a a( 7 ) ̄ 1

个样 品 , 个样 品设 3个重 复 。将 获 得 的样 品放  每

入匀浆器中 , 同时 将 匀 浆 器 外 套 置 于 冰 水 中 , 温  低 下 匀 浆 ,匀 浆 液 经 高 速 冷 冻 离 心 机 离 心 3  n 0mi   ( 20 0rrn ) 1 0 ? i  ,所 得 上 清 液 即 为消 化 酶样 品 , a 置  于冰 箱 中保存 ,4h内测 定 完所 有酶 活性 指标 。 2   
13 温 度 的设置  .

物饲喂下其肠道内麦芽糖酶 、 淀粉酶和蛋白酶的变   化进 行 了研 究  , 发现 小 同 的食 物会 导 致 消 化酶 的 
变化 ~Tki 95研 究 r摄 食后 鳗 鲡 消化 道 消 化酶  ai18) (
变化 的动力 学特 性 “:   对于黄 鳝 ( npeu l u.Z iw 的研 究 ,   Mo o trs ̄ s ue ) l b 目

用 恒 温水 浴锅 控 制 反应 温 度 ,在 2 ~ 5c 范  0 5c的 围 内 , 5c 梯 度 , 设 8个梯 度 , 温 度 分 别 为  以 c为 共 即
2 c 、5c 、0c 、5 、0c 、5c、 0c、 5c。 0c 2 c 3 c 3 ℃ 4 c 4 c 5 c 5 c  

1 . 酶 活性 测定  4

前 大 多数集 中在 性 逆 转 、 殖 习 性 、 织 观察 等 方  繁 组 面, 并取 得 了一 定 的进 展 , 对 黄 鳝 消 化器 官 内 消  但 化 酶 的研究 报 道 很少 , 见 白东清 对 黄鳝 肠道 的 消  仅 化酶 进 行 了初 步研 究  :本 文 报道 了温 度对 黄鳝 

1 . 蛋 白酶 活性 的测 定 .1 4 

采 用福 林 一 试 剂 法 , 酚  

1 蛋 白溶液 1 L 加 p . 冲液 4mL 3 ℃水  %酪   , H85缓 m   ,5

浴中保温 l  i, 0 n然后加入 1 L a r   酶液 , m 再继续保温  lrn 加 3 L 1%的三氯乙酸终止反应 , 5 i,    0 a m 取滤液 1  

收 稿 日期 :0 5 0 — 2 2 0 — 3 2 

基金项 目: 教育部 重点项 目(3 8 )湖北 省t五重大科技攻关项 日( 0 1 A 0 A ) 007 ; 2 0 A 2 1 01   作者简介 : 陈 芳(9 6 )女 、 16 ~ , 湖北 公安人 , 副教授 . 硕十 ,电话 )7 6 8 6 2 6 电  信箱 )a gaq 6 ㈣n ( 0 l— 0 6 5 ( ynd i@13 1  

湖北 农 业科 学

HU E  A RC L U A   S IN E   N .,0 5 B I G IU T R L CE C S o5 20 

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mL 加 人 05 1l 酸 钠 5mI3 ℃水浴 中显 色 1  , .5I 碳 I o   J5 , 5
m 用 7 2型 分 光 光 度 汁住 波 长 为 6 011 测 定   , 2 8  1 处 1 3

用 聚 乙烯 醇橄榄 油乳 化 液水 解法 。取 00 5m lp   .2  o H  

值 7 磷酸缓 冲液 5 L 4 L聚乙烯醇橄榄油作  . 5   和   m m
乳 化 液 , 3 ℃水 浴 中预 热 5 l  i, 后 加 入 酶  置 0 ~0rn 然 a
液 1 , 温 1  i , 即加 入 9 %乙醇 l  L 终    保 mL 5r n 立 a 5 5m , 止 反应 。 酚酞 指示 剂 3滴 , 00  o N O 加 用 .5m l a H标 准   

其吸光值。 白酶活性大小用 1 新鲜组织在 3 ℃、 蛋   g 5   p 值8 H . 件下 , 分钟 分 解酪蛋 白产生 1 g 氨  5条 每 I 酪 , x
酸 定 为一 个活性 单位 来 表示 ( g y ? mi   I T rg , z  。 n  ) 1 . 胰 蛋 白酶 活 性 的测 定  以 N 一 甲苯 磺 酰 一 .2 4 a对  

液 滴 定 至微 红 色 。并 同 时做 空 白对 照 , 照 样 品 中  对 的乙醇 在 酶 液前 加 入 。脂 肪酶 活性 大 小用 1   鲜  g新

L 精 氮 酸 甲酯 酸 盐 (AM 作 底 物 , 将 2 . mg 一 T E) 先 90    
T ME和 2 2mg a 1溶 于 10m  00   o 、H .  A 2  C C  0   l .5t lp 90 o

Ti H 1 冲液 中 , 2个 比色 池 , 别 加 入 3℃  r— C 缓 s 取 分 5
预 热 过 的 28m   A . L T ME+ .   o 、H 值 90 r —   00 t lp 5o . i   Fs

组织在 3 ℃、H值 7 条件下 , rn 0 p . 5 1 i 使脂肪分解产    a 生 1, 分 子 脂 肪 酸 的量 来 表 示 (Lft ai g。  g I z I ay c 。  , t  d? ? . g
a n。 ri 。  )

HC 缓 冲液 ( C C1, 1 含 a 1 然后 向一 个池 中加 入 02mL ) .    

T sH 1 i f— C 缓冲液混合( 作  白对照 )向另一个池中  , 加 入 02 .mL酶 液 , 即混 合均 匀 ,   立 并计 时 , 7 2分  用 2
光 光 度计 于 2711 长 处测 吸 光 值 ( , 隔 3  4 1波 1 1 A)每 0S   读 一 次 数 , 计 2mi, 据 时 间一 光 值 的 关 系曲  共   l根 l 吸 线 中 的直线 部 分 , 选 一 时 间间 隔 与相 应 的吸 光值  任
的增 量 (  A) 汁算胰 蛋 白酶 活性 : 蛋 白酶活 性 大  来 胰

2 结 果 与 分 析 
21 温度 对黄 鳝 蛋 白酶活 性的 影 响  .  
黄鳝 蛋 白酶 的 活性 与 温度 的关 系见 表 1 从表  。 1町以 看 出 , 温 度 2 ~ 5 在 0 5 ℃范 围 内 , 着 温度 的升  随

高 , 白酶 的 活 性 发 生 变 化 , 活 性 先 随 温 度 的升  蛋 其 高 而增 加 , 当温 度 达 到 4  ̄H 其 活性 最 大 , 后 , 0C  ̄, 随   随温 度 的升 高则 其活 性 反 而降 低 。温 度 在 3 ~ 5 5 4 ℃  的范 围 内 , 活性 比较 稳 定 : 因此 黄鳝 蛋 白酶 适 宜  其
的温度 应 为 3 ~ 5   5 4 ℃。

小 用 1 新 鲜组 织 在 3℃ 、H 值 90条 件 下 , mi   g 5 p . 1 l   l   内所 产生 的吸光值 的变化量 ( 增量 ) 来表示 ( A4g A 2? 7 
Ii )  ll 一 ll

1 . 淀粉 酶 活 性 的 测 定 .3 4

用 1 %可溶 性 淀 粉 作  . 0

22 温 度对 黄鳝 胰 蛋 白酶 活 性的 影 响  - 黄 鳝 胰蛋 白酶 的 活性 与温 度 的关 系 见表 2 :从  表 2可 以 看 出 , 温度 2 ~ 5 在 0 5 ℃范 围 内 , 随着 温 度 的  升 高 , 蛋 白酶 的活 性 发 生 变化 , 活 性 先 随 温 度  胰 其 的升高 而增 加 , 当温度 达 到 4  ̄H 其 活性 最 大 , 0C  ̄, 随  后 ,随温 度 的升高 则 其活 性 反而 降低 ,温度 在 3 ~ 5  4  的范 围 内 , 5 其活性 比较稳 定 。 因此黄 鳝胰 蛋 白酶 
适 宜 的温 度应 为 3  ̄ 5   5 4 ℃。

底物 , 05m 1 %淀 粉 一 酸 缓 冲 液 (.g可溶  取 . L、.   0 磷 1   0 性 淀 粉 溶 于 10m   .  1|p 0  L 00 1 、H值 80磷 酸 盐 缓  21 0 . 冲液 )于 3 ℃水 浴预 热 3 ?加 酶 液 05mL 宅 白 , 0     , .   ,   对 照 加 05mL蒸 馏 水 , 应 5Ii, 即加 D S 3  .   反  1l立 Il N (, 5 二 硝基 水杨 酸 )显 色 剂 1   ,在水 浴 中煮 沸 5 一 .mL 0   mn 终 止 反应 并 显 色 , 冷 却后 加 入 1. mL重蒸  i, 待 00   水 , 72分光 光度 计 于 5 0Hl 长测 吸光 值 用 2 4 i波 l 用  1 0mL标准 麦 芽糖 溶 液 作 同样操 作 ( 准空 白 以  .  0 标 等体 积重蒸 水替 代 ) 。淀粉酶 活性大 小用 1 新 鲜组    g 织 在 3  、H值 8 0 p . 0条件 下 , Il内 使可 溶性 淀 粉  1l l  l i 分 解 产生 麦 芽 糖 的 毫 克 数 来 表 示 ( maoe g- mg hs ?一  ?
Ii 。  ll 。 ll )

23 温 度对 黄鳝 淀粉 酶活 性 的影 响  . 黄 鳝 淀粉 酶 的活性 与 温 度 的关 系见 表 3 。从 表  3可 以看 出 , 度 在 2~ 5 温 0 5 ℃范 围 内 , 着 温 度 的升  随

高, 淀粉酶 的活性发生 变化 , 其活性先随温度 的升  高而增加 , 当温度达到 3 ℃时 , 5 其活性最 大 , 随后 ,   随温度 的升高则其活性反而降低 ,温度在 3 ~ 0   04 ̄ C

1 . 脂 肪 酶 活 性 的 测 定  脂 肪 酶 活性 的 测 定 采  .4 4

表 1 黄鳝 蛋 白酶 活 性 (g rg ? nj 温 度 的关 系    u  ?  mi 与  
温 度,   2  O 2  5 5  O 5  5

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湖 北 农 业科 学

HU E  A RC L U A   S IN E  N .,0 5 B I G IU T R L CE C S o5 20  高 , 肪 酶 的 活性 发 生 变 化 , 活 性 先 随 温 度 的 升  脂 其 高而 增 加 , 当温 度 达 到 3 oH 其 活性 最 大 , 后 , oc  ̄, 随  

的范 围 内 , 活 性 比较 稳 定 : 因此 黄鳝 淀 粉 酶适 宜  其
的温度 应 为 3 - 0C   0 4  ̄。

24 温 度对 黄鳝 脂肪 酶 活性 的影 响  .

黄 鳝脂 肪 酶 的活性 与 温 度 的关 系 见表 4 从表    4可 以看 出 , 度在 2 ~5c 围 内 , 温 0 5 c范 随着 温 度 的升 

随温度的升高则其活性反而降低 ,温度在 2 -5   53 ̄ C 的范 围 内 , 活性 比较稳 定 。因此 黄 鳝 脂肪 酶适 宜  其
的温 度应 为 2 - 5C。 53 ̄  

表 4 黄鳝 脂 肪 酶 活 性 ( t ai?。 ni。与 温 度 的关 系  u t cd g。 i 。   > ? n)

3 讨 论 
试 验 表 明 , 鳝前 肠 的消 化 酶 的活 性 随着 温 度  黄 的 变化 而 改变 , 同的 消化 酶 有其 不 同 的适 宦 温度  不 范 围 , 白酶的适 宜 温度 范 围 为 3 - 5C, 蛋 白酶  蛋 54 ̄ 胰
为 3 ~ 5c、 5 4 c 淀粉 酶 为 3 ~ 0c, 肪 酶 为 2 ~ 5 。 04c 脂 5 3   

响到 鱼类 的代 谢 等 ,从 而 问接 影 响 到 消 化酶 的 活 
性。  
参考文献 :  
l] 黄 】 [] 黄 2  峰, 严安生 . 鳙胰 蛋白酶 的研究… . 鲢  水产学 报 .9 6 2  19   0 峰 , 安生.鲢 、 严 鳙蛋 白酶 和淀粉酶的研究ll  l J 中国水 产科 
( )6 — . 1 : 8 71 

从黄 鳝 的 消化 酶活 性 最适 温 度 看 , 高于 栖 息环 境  要 的温 度 , 与其 他一 些 鱼类 的差 异 不 大 。大 多研 究 认  为鱼类 消 化酶 最适 温 度 范 围很广 , 从最 低 2 c到 最  5c 高 6  ̄ 消化 酶 活性 的最 适 温 度 比鱼类 栖 息 水域 的  0C, 温度要高, 因此 , 崎 久 雄 (95 认 为 , 温度 方 面  尾 18 ) 从 看, 生活 环境 对 酶 不起 最 大 作用 :但佐 佐 木 (92  18 ) 对鳗 鱼 胃蛋 白酶 研 究 发现 , 化 酶 的最适 温度 与 消  消

学 l9 , ( ) 1- 7 9 9 6 2 :4 1 .  

[ ] 倪寿文 , 3 桂远 明, 刘焕亮.草鱼 、 、 、 鲤 鲢 鳙和 尼罗非 鲫脂肪酶活  性的 比较研究l1 J. 水产学 院学报 ,9 0 5 3 4 :9 3 . 大连 19 . (- ) 1 —0  [ ] 倪芍文 , 4  桂远明 , 刘焕亮.草鱼 、 、 、 鲤 鲢 鳙和尼罗非鲫 淀粉酶活  件 的比较研究l1 J. 水产学 院学报 ,9 2 7 1 :4 3 . 大连 19 , ( )2 - 0  [ ] 叶 元土.鲤鱼 肝脏和 肠道 淀粉酶 活性 的研究… 5 
l9 , l 1 ) l— 6 9 2 l( 0 :4 1 .  

水 产科学 ,  

[ ] 吴婷畔 , 6 朱晓鸣. 、 鳜鱼 青鱼 、 草鱼 、 、 、 鲤 鲫 鲢消化酶活性 的研究 
  ll lI{国水产科学 ,9 4 2 :0 l . Jl 19 ( ) l一   7 [ ] 刘 E梅 , 7  朱谨钊. 对虾消化酶的研究l1 J. 海洋科学 ,9 4 5)4 — l8 ( :6  
5  0

化酶与底物作用的n 1有关 ,  ̄1  ̄ 消化酶与底物作用时 
问越 长 , 所测 得 的最 适 温 度 越 低 , 与 底 物 作 用 时  当
间 为 3 r n时 , 适 温 度 为 5 ℃ , 作用 时 间延 长  0i a 最 0 但

8 畅蕙萍 , ] 童圣英 , 杨子 臣. 纹盘鲍蛋 白酶 的研究…. 皱 水产学报 ,  
l9 2) 2 一l 3  9 7( :18 3 .

到 1  , .h 最适 温 度下 降 为 4 c: 5 2c 同时 , 离体 条 件下所  测 得 的 消化 酶最 适 温 度 只是 消化 酶 活性 最 大 时 的  反 应温 度 , 鱼类 活 体情 况 下 , 果环 境 温 度改 变 , 在 如  

[ ] 桂远明 , 9 吴

垠, 刘焕亮 , . 对草 鱼 、 、 、 主 要消 化酶  等 温度 鲤 鲢 鳙

活性 的影 响l1 J .大连水产学院学报 ,9 2 74) l8 19 ,( :一  [0 K 1]  wA , .IE IS K DA, .Su iso te Di sx  nyl   f S tde  n h  g t e E zue o  ei s
H s t.、.De eo me to h  Die t   zhiso  a’  n   h  1 S   v lp n  fte g sie En ? e  fC i a d x , P

不仅影响消化酶的活力 , 面且还可能影响消化酶的 
分泌 量 , 从而对 消化 率产 生影 响  因此 , 离体 条件下  测 定 的消 化 酶 最 适 温 度 只反 映 了消 化 酶 的热 稳 定 
性 和 温 度对 酶 活 力 的影 响规 律 , 不能 准 确反 映 温  并

Bak S a Be m AtrH thn [ .B l Jp Sc S i i   le  e  ra   f   ac igJ ul a  o  c s e ]    F h.
17 (8 :6 - 7 . 9 2 3 ) 2 5 2 0 

I l  T I K,HI N   .hn e n Dg s ̄  n、i -t is    lJ  K I S ME O sC agsi  iet’ E zh k i t     i e e ex e i
i E l't  edn 】 ul a  o  r Fs,9 55 ) 0 7   l e a e Fe i .B l JpS eSi i 18 (  : 2 — l   fr       h I2
2 031 .  

度 对 消化 率 的影 响情 况 =在 自然 条件 下 , 水温 对 鱼  类 的摄 食 、 长 起 的重 要作 用 是 对鱼 体 整体 起 作 用  生
的结 果 , 水温 不 仅 直 接 影 响 消 化 酶 的 活性 , 而且 影 

[ 2 自 尔清 , 良启 , 1]   龙 贾

林 , 黄鳝肠组织 消化酶初探_ . 等. J 湖北  1

农业 科学 ,9 75 :6 5 . l9 ( )5 — 9  

Efe t o   m p r t e o  Di e tv  En yme f c   f Te e a ur   n g sie z  Ac i iis f M on pt r s l us tv te  o   o e u  a b  

CHEN  n  ̄YANG  i q n。RUAN  Fa g , Da — i , Gu - i n 。 YAN A n—s ng o l g a he  


(. 1  L

S in e olg ,'n te Unv li Jn z o   3 0 5 Hu e , i a   ce c C l e] gz  le‘t igh u 4 4 2 e a s  b i Ch n :
, ,

2 Aq a’h r  l g , a h) g Ag i u m’ Un x li   . u ( u e Col e Hu z (   r h a u e n e l i e st ‘ 3

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Bewe I 0 5 ℃ , i  t e i e e s  o e e au e t e  2 ~ 5 w t h   n r a e t mp r t r 1 h  t
b l 、 】I e p r l ’ g l O 】 、 J e u 、 P1 t e a l e o S ne a u t  lu u 



te c i i e   f p o e s   l sn a %a e n   lp s   n r a e  a f h  a tvt s o   r t a e t i Tp i  m  s a d r l iae ice s d t i  


te rtvte 。  t  f r i e t、  e z , s e r a e h  a iii s f he ou  d g sie n   me  d c e s d Th 。 i1 e ptnum t emp r t r  f r eaue o 


p’ e s   s 3 ~ 5 ,a d t p i i 3 ~ 5 ,a 1l s i 3  ̄ 0 C,l a e s 2 ~ 5 r 。 e tv l, l t a P i  5 4 ℃ o n   r sn s 5 4 ℃ 3   nya e s 0 4  ̄   i s i 5 3 ℃ e p c ie 、  p   .

Kyw rsM np r a ;m e ted ete  n  e  od:o(t  / t plu ;isV )1 )e b e ‘ r g i n_e a

( 责任 编辑 王

珞)  


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