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转录后水平的基因沉默


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基础医学与临床    Basic Medical Sciences and Clinics

1  基因沉默的机理

核后 ,会受到多种因素的作用 ,根据其作用机制和水 平不同可分为三种 : 位置效应 ( position effect ) 、 转录 水平的基因沉默 ( transcriptional gene silencing ,TGS) 和 转录后水平的基因沉默 ( post2transcriptional gene si2 lencing ,PTGS) 。
111   位置效应

活甲基化酶 ,使外源序列甲基化而降低其转录活 。 112   转录水平的基因沉默 转录水平的基因沉默是 DNA 水平上基因调控
收稿日期 :2001 - 03 - 01    修回日期 :2002 - 12 - 31

文章编号 : 100126325 ( 2003 ) 0120024206 景。 中图分类号 :Q7    文献标识码 :A

转录后水平的基因沉默 —— — RNA 干涉
郭晓红 , 周忠孝

( 山西农业大学 动物科技学院 动物遗传育种与繁殖 , 太谷 030801)

基因沉默 ( gene silencing) 是指生物体中特定基 因由于种种原因不表达 [1 ] 。外源基因进入受体细胞

位置效应是指基因在基因组中的位置对其表达 的影响 。外源基因进入受体细胞核后首先整合到染 色质上 ,其整合位点与表达有密切的关系 。如果整 合到甲基化程度高 、 转录活性低的异染色质上 ,一般 不能表达 ; 如果整合到甲基化程度低 、 转录活性高的 常染色质上 ,其表达受两侧 DNA 序列的影响 。植物 基因组常是由具有相似 GC 含量 DNA 的片段相互嵌 合在一起的 ,对玉米 AI 基因及其他转基因沉默植株 中的 GC 含量的研究表明生物体可以通过外源基因 与其两侧序列 GC 含量的差别来识别外源基因 , 激

通讯方式 : 电话 0354 - 6288585 ; E2mail :guoxiaohong313 @163. com

摘要 : RNA 干涉 ( RNA interference ,RNAi) 是 1998 年首次在秀丽线虫中发现并证明属于转录后水平的基因沉默 ( PT2
GS) 机制 。它利用双链 RNA ( dsRNA) 特异性地降解相应序列的 mRNA 成为 siRNA ,从而特异性地阻断相应基因的表

达 ,广泛存在于从真菌到植物 、 从无脊椎动物到哺乳动物的各种生物中 。本文介绍了基因沉默的机理 、 干涉的 RNA 分子机制及技术应用等方面的进展 ,RNA 干涉在后基因组时代的基因功能研究和药物开发中将具有广阔的发展前

关键词 : PTGS ; RNA 干涉 ; dsRNA ; 短干涉 RNA ( siRNA)

的结果 ,主要是由启动子甲基化或导入基因异染色 质化所造成的 。二者都和转基因重复序列有密切关 系 。重复序列可导致自身甲基化 。外源基因如果以 多拷贝的形式整合到同一位点上 , 形成首尾相连的 正向重复 ( direct repeat ) 或头对头 、 尾对尾的反向重 复 ( inverted repeat ) ,则不能表达 。而且拷贝数越多 , 基因沉默现象越严重 。这种重复序列诱导的基因沉 默 ( repeat2induced gene silencing ,RIGS) 与在真菌中发 现的 重 复 序 列 诱 导 的 点 突 变 ( repeat2induced point mutation ,RIP) 相类似 , 均可能是重复序列间自发配
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对 ,甲基化酶特异性地识别这种配对结构而使其甲 基化 ,从而抑制其表达 。此外 ,重复序列间的相互配 对还可以导致自身的异染色质化 。其机理可能是异 染色质化相关蛋白质识别重复序列间配对形成的拓

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扑结构与之结合 ,并将重复序列牵引到异染色质区 , 或直接使重复序列局部异染色质化 。 113   转录后水平的基因沉默 转录后水平的基因沉默是 RNA 水平基因调控 的结果 ,比转录水平的基因沉默更普遍 。特别是共 抑制 ( cosuppression) 现象尤是研究的热点 。共抑制

是指在外源基因沉默的同时 ,与其同源的内源 DNA 表达也受到抑制 。转录后水平的基因沉默特点是外 源基因能够转录成 mRNA , 但正常的 mRNA 不能积

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累 ,也就是说 mRNA 一经合成就被降解或被相应的 反义 RNA 或蛋白质封闭 ,从而失去功能 。这可能是 由于同源或重复的基因表达了过量 mRNA 的结果 。 Dawson 提出 ,细胞内可能存在一种 RNA 监视机制用 以排除过量的 RNA 。当 mRNA 超过一定的阈值后 , 就引发了这一机制 , 特异性的降解与外源基因同源 的所有 RNA 。 此外 , 过量的 RNA 也可能和同源的 DNA 相 互 作 用 导 致 重 新 甲 基 化 ( de novo methyla2 tion) ,使基因失活 。 上述三种机制并不是独立的 ,而是相互关联的 。

2  RNAi 现象

基因沉默机制在核酸水平上均是 DNA2DNA ,DNA2 RNA ,RNA2RNA 相互作用的结果 , 所以人们认为对 基因沉默机制的研究开启了认识 DNA 水平及 RNA 水平上调节基因表达的新纪元 ,并提出了基因免疫 , 即基因组对外源基因入侵有抵抗能力的新概念 。
RNA 干涉的现象大致可以分为三种 , 它们的作

用机制大体相同 ,只是不同的研究小组对 RNA 干涉 的命 名 不 同 , 植 物 学 家 称 之 为 共 抑 制 ( cosuppres2 sion) ,菌类学家称之为静息作用 ( quelling) ,昆虫学家 和动 物 学 家 称 之 为 RNA 干 涉 ( RNA interference , RNAi ) [2 ] 。 现了一种转基因同时抑制自身和相应内源基因表达 现了一个意想不到的现象 。她们本是利用反义 RNA 技术特异性地阻断上述基因的表达 , 同时在对 照实验中给线虫注射正义 RNA ( sense RNA) 以期观 察到基因表达的增强 。但得到的结果是二者都同样
[5 ]

的基因沉默现象 [3 ] 。他们本欲通过加入外源色素合 成基因拷贝而产生出更深的紫色牵牛花 , 但是实验 并未达到预期的结果 , 有的转基因植物开出了全白 或部分白的花 ,这表明色素的合成不是被增强了 ,而 是被关闭了 。事实上 ,不仅导入的基因没有表达 ,植 物自身的色素合成基因也失活了 , 这种现象被称为 基因的共抑制 ( cosuppression) 现象 。 1994 年 ,Macino 和 Cogoni 发现将合成类胡萝卜 素所需的基因导入粗糙红色链孢霉 , 导致 30 %的转 化细胞中霉菌本身的基因失活[4 ] , 并将其称之为基 因的静息作用 ( quelling) 。
1995 年 ,康乃尔大学的 Su Guo 博士在试图阻断 秀丽新小杆线虫 ( C. elegans ) 中的 par21 基因时 , 发

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基因抑制效应变得十分微弱 , 而经过纯化的双链 RNA 却正好相反 ,能够高效特异性阻断相应基因的 表达 [5 ,6 ] 。该小组将这一现象称为 RNA 干涉 ( RNA interference ,RNAi ) 。 在随后的短短几年中 ,RNA 干涉现象被广泛地 发现于真菌 、 脉胞菌 、 拟南芥 、 、 、 、 水螅 涡虫 锥虫 斑马 鱼等大多数真核生物中 。这种存在揭示了 RNA 干 涉很可能是出现于生命进化的早期阶段 。

3  RNAi 的机制及特点
311  RNAi 的分子机制

1990 年 ,Rich Jorgensen 及其同事在矮牵牛中发

DNA 病毒 、 重组基因 、 转基因等 DNA 序列 ,在细胞转

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录出 RNA 后 ,经 RdRP 形成 dsRNA ; 而转座子由于其 本身具有反向重复序列 ( inverted repeats) , 细胞可以 通过 “通读转录” 这种反向重复序列直接产生 dsR2 [30 ] NA ; 细胞中正义和反义 RNA 的同时转录也可产 生 dsRNA ; 在线虫中 ( C. elegance) 可以通过直接注射
dsRNA 或将线虫浸泡在含 dsRNA 溶液中等方式引

地切断了 par21 基因的表达途径 。这是与传统上对 反义 RNA 技术的解释正好相反的 。该研究小组一 直没能给这个意外以合理解释 。直到 1998 年 2 月 , 华盛顿卡耐基研究院的 Andrew Fire 和马萨诸塞大 学医学院的 Craig Mello 才首次揭开这个悬疑之谜 。 通过大量艰苦的工作 ,他们证实 ,Su Guo 博士遇到的 正义 RNA 抑制基因表达的现象 , 以及过去的反义 RNA 技术对基因表达的阻断 , 都是由于体外转录所 得 RNA 中污染了微量双链 RNA 而引起 。当他们将 体外转录得到的单链 RNA 纯化后注射线虫时发现 , 虽然遗传学和生物化学的方法都已用于探索 RNA 干涉的机制 , 但其真正的机理尚未明了 。目前 认为其可能机制 [7~9 ] 可分为三步 。 第一 步 : dsRNA 的 形 成 。dsRNA 是 诱 导 细 胞
RNAi 的关键组分 , 外源 DNA 、 RNA 序列均可激发细

胞产生相应的 dsRNA , 但产生的方式不同 。RNA 病 毒在病毒或细胞中 RNA 依赖性 RNA 聚合酶 ( RNA2 dependent RNA polymerases ,RdRP) 的催化下 , 合成病 毒的 RNA 序 列 互 补 链 , 并 与 之 结 合 形 成 dsRNA ; 入外源 dsRNA ; 这种 dsRNA 可以是分开的两个 RNA 分子互补形成分子间双链 ,也可以是一个 RNA 分子 回折 , 自身互补 , 形成分子内双链 。然而 , 细胞是如 何判定哪些 RNA 和 DNA 是 “异己” 进而产生相应的 dsRNA ,其机制尚不清楚 。
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第二步 : siRNA 的形成 。形成的 dsRNA 要在细 胞中大量扩增 ,当其在细胞中达到一定量的时候 ,会 被一种特异的核酸内切酶 ( 一种具有 RNase Ⅲ样活 性的核酸酶 , 在果蝇中称为 Dicer , 含有解旋酶活性 以及 dsRNA 结合结构域和 PAZ 结构域) 识别并与之 结合形成酶2dsRNA 复合体 。在该酶的作用下 , 细胞 中的单链靶 mRNA ( 即与 dsRNA 具有同源序列的 mRNA) , 会 与 dsRNA 的 正 义 链 发 生 链 互 换 , 原 先 dsRNA 中的正义链被 mRNA 代替 , 从酶2dsRNA 复合 物中释放出来 , 而 mRNA 则处于原先的正义链的位 置 。此后 ,在 ATP 的参与下 [29 ] , 细胞中存在的另一 种复合体 —— — RNA 诱导的沉默复合体 ( RNA2induced silencing complex , RISC 。由 核 酸 内 切 酶 、 酸 外 切 核 酶、 解旋酶等组成 , 对靶 mRNA 具有识别和切割作 用) 利用结合在其上的核酸内切酶活性切割靶 mR2
siRNA) 。它又可以指导形成 RISC 复合体 。

量的 dsRNA 分子就能完全抑制相应基因的表达 , 能 在低于反义核酸几个数量级的浓度下研究目标基 因 ; 比基因敲除术更快更简单 ; 而且 , 那些在胚胎中 敲除后导致死亡的基因 , 也可以利用 RNAi 的方法 在培养细胞中进行研究[28 ] ; ( 5) 双干涉系统 。哺乳 动物细胞中存在两条相互独立的 “干涉” 途径 : 非特 异性干涉反应 , 由 > 30bp 序列的 dsRNA 介导 , 可导 致整个细胞非特异性蛋白合成抑制及 RNA 降解 ; 特 异性干涉反应 ,由 21~23nt 的 siRNA 介导 ,可逃避非 特异性干涉系统的 “监控” 只降解与其序列相应的 , ( 6 ) 高穿透性 。RNAi 抑制基因 单个基因的 mRNA ; 表达的效应可以穿过细胞界限 , 在不同细胞间长距 离传递和维持 。在线虫中干涉效应甚至可以传递到 后代中去 。

NA 分子中与 dsRNA 反义链互补的区域 [10 ] , 形成了

4  RNAi 技术及其在功能基因组中的应用

21~23 核苷酸长的 dsRNA 小片段 , 称之为短干涉 RNA ( short interfering RNA 或 small interfering RNA ,

第三步 :RNAi 的形成 。siRNA 还可作为一种特

由于 RNAi 作用能够定向关闭生物体内的某一 基因 ,使其不发挥作用 , 同时不影响其它基因 , 所以 方便了人们对特定基因功能的研究 ,于是应用 RNAi 的原理 ,RNAi 技术应运而生 。
411  RNAi 技术

殊的引物 , 在 RdRP 酶的作用下以靶 mRNA 为模板 合成 dsRNA 分子 , 这些 dsRNA 分子又可被 RISC 切 割形成新的 siRNA ,新的 siRNA 又可进入上述循环 , 这种过程称之为随机降解性聚合酶链式反应 ( ran2 dom degradative PCR) 。新生的 dsRNA 反复合成和降 干涉机制的启动阶段 , rde22 、 27 、 22 、 2 mut smg smg [22~26 ] 5 、 6 等基因的参与干涉的维持阶段 smg 。 312  RNAi 的特点 RNAi 主要有 6 个特征 [8 ] : ( 1) RNAi 是 dsRNA 介 导的转录后水平的基因沉默 ( PTGS) 机制 。( 2) 高稳
[22 ]

将功能未知的基因的编码区 ( 外显子) 或启动子 区 ,以反向重复的方式由同一启动子控制表达 ,这样 在转基因个体内转录出的 RNA 可形成 dsRNA ,产生 RNA 干涉 ,使目的基因沉默 , 从而进一步研究目的

解 ,不断产生新的 siRNA , 从而使靶 mRNA 渐进性减 少 ,导致目的基因沉默 ,呈现 RNAi 现象 [10 ] 。 目前发现 , RNAi 涉及到的基因包括 Neurospora qde21 , Arabidopsis SDE21/ SGS22 和 C. elegans ego21 ( 编 码 RNA2dependent RNA polymerases , [18~21 ] RdRPs) 。线虫 rde21 和 rde24 基因参与 RNA

定性 。以 3′ 端悬垂 TT 碱基的 dsRNA 尤为稳定 , 无 需象反义核酸那样进行广泛的化学修饰以提高半衰 期 [27 ] ; ( 3) 高特异性 。siRNA 除正义链 3′ 端的两个碱 基在序列识别中不起主要作用外 , 其他单个碱基改 变就可能使 RNAi 失效 , 而针对同源基因共有序列 的 RNAi 则导致同源基因共同失活 ; ( 4) 高效率 。少

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基因的功能 , 这种技术即为 RNAi 技术 。根据所选 用序列的不同 , 可将其分为编码区 RNAi 和启动子 区 RNAi 技术 。 41111   编码区 RNAi 技术 : 自 1998 年在线虫中发现 RNAi 现象以来 , 以基因编码区为靶序列的编码区
RNAi 技术已用于线虫功能基因组的研究 。最初这

种技术是通过注射或浸泡等方法直接导入到线虫的 性腺或早期胚胎中 。这些方法虽然可以关闭目的基 因的表达 ,产生突变表型 ,但这种表型变化却不能遗 传 。这种早期的 RNAi 技术可以用于研究与胚胎发

育有关的基因的功能 , 但由于细胞分裂造成 dsRNA 的稀释 ,使得这种方法在研究成体的基因功能时有 一定的局限性 。 为弥补早期 RNAi 技术的上述不足 ,Tavernarakis 等对 RNAi 技术进行了改进 , 将反向重复排列的目 的基因插入表达载体热激启动子下游 , 由启动子控 制在转基因生物中表达 。热激处理后 , 反向重复序
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NA 链同其他载体的 shRNAs 一样 ,具有 5T 的终止信

成为 3′ 2悬垂茎环结构 , shRNAs 在 体 内 转 变 成 UU 21nt siRNA 样 的 分 子 , siRNA 样 的 分 子 可 以 引 起 RNAi [11 ] 。另一种 siRNA 表达载体在 pol Ⅲ 启动子作 [12 ] 用下编码正义和反义 siRNA 链 , 这种载体的 siR2 号 。两种载体的沉默功效可以与瞬时转染的 siRNA 引起的沉默相媲美 。 这种技术解决了以往难以解决的诸多问题 。首 先使转基因可以遗传给后代 ,有利于突变的分析 ; 其 次 dsRNA 可以被诱导产生 ,RNAi 能够在发育特定阶 段出现 ,从而使研究发育早期必需基因在发育晚期 的功能成为可能 ; 另外 ,当用细胞特异性启动子控制 dsRNA 的表达时 , 可以研究特定基因在不同器官中 的功能 。 有启动子区的 dsRNA 在植物体内同样被切割成 21 ~23nt 长的片段 ,这种 dsRNA 可使内源相应的 DNA 序列甲基化 ,从而使启动子失去功能 ,使其下游基因 沉默 。由于多基因家族的各成员之间高度同源 , 因
41112   启动子区 RNAi 技术 :M. F. Mett 等证明含

地了解多基因家族各成员的功能 。 4. 2  RNAi 技术的优点 与其它几种进行功能丧失或降低突变的技术相 比 ,RNAi 技术具有明显的优点 : 首先 ,它比反义 RNA 技术和同源共抑制更有 效 ,能在低于反义核酸几个数量级的浓度下 ,使目标 基因表达降到极低水平甚至完全 “剔除” 从而产生 , 缺失突变体表型 , 因此更容易产生功能丧失或降低 突变 。 其次 ,与 T2DNA 技术造成的功能永久性缺失相 比 ,RNAi 技术通过与细胞特异性启动子及可诱导系 统结合使用 ,其抑制基因表达的时间可以随意控制

列在细胞内开始转录 , 其产物会形成具发夹环结构 的 dsRNA ,从而产生 RNAi ,使目的基因沉默 。其中 , 表达载体主要有两种 : 一种设计为表达短发夹 RNAs ( small hairpin RNAs ,shRNA) , 载体包括 pol Ⅲ 425T 和 转录终止位点间的 shRNA 序列 , 转录终止于终止子 的第二位 (pol Ⅲ 转录产物一般缺少多聚 A 尾) ,折叠 而使用编码区 RNAi 技术很难将各个成员区分开来 研究 ,而多基因家族内的启动子序列通常比编码区 变化大 , 采用启动子区 RNAi 技术有望将多基因家 族的 各 个 成 员 区 分 开 来 研 究 。这 样 综 合 编 码 区 RNAi 技术和启动子区 RNAi 技术的信息即可更全面

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在发育的不同时期或不同器官中有选择地进行 , 这 是更受科学家偏爱的 。 第三 , 与传统的同源重组基因剔除技术以及 RNA/ DNA 嵌合分子介导的高效基因转变都只能一 次改变一个基因相比 , 利用 RNAi 可以实现多种基 因突变 ,这是传统的制作突变体的方法无法实现的 。 具体来讲 ,RNAi 技术可以利用同一基因家族的多个 基因具有一段同源性很高的保守序列这一特性 , 设 计针对这一区段序列的双链 RNA 分子 ,注射一种双 链 RNA 即可以产生多个基因同时剔除的表型 。也 可以同时注射多种双链 RNA 而将多个序列不相关 的基因同时剔除 。它可以仅仅在一周时间内关闭 10 个基因的表达 ,比基因剔除技术更快更高效 。 此外 ,联合利用传统的缺失突变技术和 RNAi 技术可以很容易地确定复杂的信号转导途径中不同 基因的上下游关系 ;RNAi 还可以产生基因降低表达 (即基因功能被不同程度地受到抑制 ,knockdown) 的 各种表型 。 413  RNAi 技术在功能基因组中的应用 在功能基因组研究中 , 需要对特定基因进行功 能丧失或降低突变 , 以确定其功能 。由于 RNAi 具 有高度的序列专一性 ,可以特异地使特定基因沉默 , 获得功能丧失或降低突变 , 因此 RNAi 可以作为一 种强有力的研究工具 , 用于功能基因组的研究 。越 来越多的科学家利用 RNAi 技术研究人 、 鼠和其他 这项设备较化学合成经济 , 特别是当需要合成多种 不同的 siRNA 时相对更为便宜 。siRNA 一旦合成 , 就被通过瞬时转染导入细胞 ,由于功效不同 ,研究者 们合成 3~4 个适合目的基因的 siRNAs ,并进行 pilot 实验 来 决 定 最 有 效 的 一 种 。用 这 种 方 法 观 察 到 但是 ,RNAi 技术仍存在一些问题 。比如 : 虽然 RNAi 在小鼠卵细胞和胚胎中得到证实 ,但双链 RNA 在其他哺乳动物通常引起整个细胞蛋白合成非特异 性抑制 ,mRNA 降解 ,细胞死亡 。最近在该方面获得 的一点突破是 , 德国科学家发现长度仅为 21 ~ 25nt 的双链 RNA , 能激发哺乳动物细胞特异性 RNAi 效
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哺乳动物的细胞培养系 , 通过瞬时转染 siRNA 导入 哺乳动物细胞引起哺乳动物中的 RNAi 。早期对于 哺乳动物的研究中 ,siRNA 由化学合成 。近来 ,Am2 bion 公 司 引 进 一 项 成 套 设 备 ( the Silencer TM siRNA Construction K ) 来进行体外的 siRNA 的转录合成 , it
90 %之多的沉默现象 [13~17 ] 。

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应 ,并抑制非特异性 RNAi 反应 , 从而为 RNAi 技术 广泛应用于人类基因功能研究以及疾病治疗展示了 美好的前景 。目前 RNAi 技术作为研究基因功能的 有力工具 , 已经在真菌 、 植物 、 蠕虫 、 低等脊椎动物 (如斑马 鱼 ) 以 及 哺 乳 动 物 基 因 功 能 研 究 中 获 得 成功 。    

肠杆菌获得 RNAi 信号 ,说明 RNAi 信号还能实现种 间传递 。 线虫和果蝇的全基因组序列都已测序完毕 , 发 现大量未知功能的新基因 , RNAi 将大大促进对这 些新基因功能的研究 。RNAi 也有可能用于人类疾 病的基因治疗 。自发现以来 , RNAi 现象的广泛程 度远远超过了研究人员最初的预测 , 这个意外的发 现以及随后的深入研究很快将真菌 、植物和动物中 的基因沉默研究统一起来 。Bosher 认为 RNAi 研究 将是未来十年生物学研究中最激动人心也最有可能 产生丰富成果的领域之一 ( 中国科学院武汉文献情 报 中 心 摘 自 : Physics News Update http : / / www. aip . org/ enews/ physnews) 。RNAi 技术以其较其它多 种技术的突出优点和在各个领域 , 尤其是对于人类 细胞中基因功能的分析和基因特异性的治疗方面的 突出优势 , 在未来的发展中将具有更加广阔的发展 前景 。

5  RNAi 研究的前景和意义
RNAi 具有多方面的应用 。在抵抗病毒入侵方

面 ,可以利用 RNAi 技术产生抗病毒的植物和动物 , 制作转基因动植物 , 使其转录产生相应于病毒繁殖 关键基因的双链 RNA , 从而抵抗病毒入侵和繁殖 , 而且可以利用不同病毒的转录序列中高度同源区段 相应的双链 RNA 实现抵抗多种病毒 ; RNAi 技术可 以抑制转座子活动 、 防止自私基因序列的过量增殖 , 控制生物体的发育和调控基因表达 。研究还表明 , RNAi 效应可以由线虫成虫传递到子代 ,暗示获得性 遗传有可能存在 ; 通过吞噬大肠杆菌 ,线虫还能从大

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gene expression by small double2stranded RNAs in inverte2

212nucleotide RNAs mediate RNA interference in cultured

uridine 3’ overhangs efficiently suppress targeted gene expres2

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organisams such as f ungi to plant , from invertebraet to mammalian. In this paper , recent advances of the molecular mechanism of gene silencing and RNAi , the RNAi technique and it ’ application were reviewed. The discovery of RNAi s and may yield RNA2based genotherapy for human disease. Key words : PTGS ; RNA interference ( RNAi) ; dsRNA ; siRNA

transcriptional gene silencing. It degrades mRNA specifically into siRNA through the mediation of corresponding double2 stranded RNA , leading to the suppression of specific gene expression. Also , RNAi exists in many species from eukayotic and the following studies on the molecular mechanism lead to the development of new strategies for blocking gene function
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Abstract : RNA interference ( RNAi ) is first discovered in C. elegans in 1998 and was identified to be involved in Post2

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Post2transcriptional gene silencing : RNA interference
G UO Xiao2hong , ZHOU Zhong2xiao

RNA interference and nonsense2mediated decay in Caenorhab2


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(二)转录后水平基因沉默 转录后水平基因沉默是指基因在细胞核内能稳定转录, 但在细胞质里却无相应稳定态mRN A存在的 现象。与转录水平基因沉默不同,转录后水平...
转录水平siRNA介导的基因沉默
转录水平siRNA介导的基因沉默_建筑/土木_工程科技_专业资料。转录水平siRNA介导的基因沉默转录水平 siRNA 介导的基因沉默 左刚毛建平* (军事医学科学院放射和辐射医学...
转录后基因沉默及其在作物遗传改良中的应用
转录后基因沉默及其在作物遗传改良中的应用摘要 转录后基因沉默 ( PTG S ) 或 R N A 干扰 ( R N Ai ) 技术的发展为 创造植物遗传变异体提供了新途径 。...
遗传学基因沉默摘要
基因沉默发生在 两种水平上,一种是由于 dna 甲基化、异染色质化以及位置效应等引起的转录水平的基 因沉默;另一种是转录后基因沉 默。rna 干扰(rnai)是一种...
病毒诱导的基因沉默
诱导的沉默复合体(RNA-induced silencing complex,RISC),RISC 特异地与细胞质中的同源RNA互作,导致同源RNA降解,从而发 生转录后水平的基因沉默 (Post-...
真菌基因(簇)的沉默及其激活机理
基因沉默一般发生在 2 种水平上,即:转录水平的基因沉默(transcriptional gene silencing,TGS)和转录后水平的基因沉默(post-transcriptional gene silencing, PTGS)[3...
胚胎论文
基因沉默发生在两种水平上,一种是由于 DNA 甲基化、异染色质化以及位置效应等引起的转录水平的基因沉默;另一种是转录后基因沉默。RNA 干扰(RNAi)是一种新...
小片段RNA在基因沉默中的作用(翻译版)
这也同时表明: 这些小片段RNA可能是移动的沉默信号,这种观点在最近被提出。 在植物细胞中,转录后水平的基因沉默的作用机制是探测细胞中的 RNA 并且特异性 的降解...
高级分子生物学试题及答案
(2) (3)与靶 mRNA 3’-UTR 结合,序列特异性的在转录后水平调控基因的翻 ...Hamilton 认为内源性基因共抑制现象属于转录后的基因沉默现象。 1998 年,Fire ...
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